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大鼠胰島β細胞瘤細胞;RIN-m5F使用說明書

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更新時間:2017-02-13 08:54:26瀏覽次數:209次

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產品簡介

大鼠胰島β細胞瘤細胞;RIN-m5F使用說明書細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

產品名稱大鼠胰島β細胞瘤細胞;RIN-m5F使用說明書
貨期3-5天
發貨地上海

細胞名稱  大鼠胰島β細胞瘤細胞;RIN-m5F使用說明書
形態特性   上皮細胞樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細胞是大鼠胰島細胞RIN-m的克隆,分泌胰島素及L型多巴脫羧酶,不產生生長激素抑制激素。 
培養條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3~1:6傳代,每周換液2~3次
傳代情況  C3
凍存條件   基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養法(-)
STR   -
同工酶  
染色體  
使用權限  A類

大鼠胰島β細胞瘤細胞;RIN-m5F使用說明書復蘇操作要點: 
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
大鼠胰島β細胞瘤細胞;RIN-m5F使用說明書操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
L-天冬氨酸;L-天冬酸;L(+)天*;L(+)氨基丁二酸;L(+)氨基琥珀酸    L-Aspartic acid;L-Asparaginic acid;L-AMinobutanedioic acid;L-AMinosuccinic acid    56-84-8
L-纈氨醇    (S)-(+)-2-Amino-3-methyl-1-butanol    2026-48-4
L-*芐酯對甲苯磺酸鹽    L-Valine benzyl ester 4-toluenesulfonate    16652-76-9
L-*甲酯鹽酸鹽    L-Valine methyl ester hydrochloride    6306-52-1
L-異*;;;L-α-氨基-β-甲基戊酸    L-Isoleucine;L-2-AMino-3-Methylpentanoic acid;L-2-AMino-3-Methylvaleric acid    73-32-5
L-異*甲酯鹽酸鹽    Methyl L-isoleucinate hydrochloride    18598-74-8
L-*鹽酸鹽    L-Histidine hydrochloride monohydrate    5934-29-2
M2培養基(2-8℃)    NA    人抗血小板抗體(anti-PA Ab)免疫試劑盒    Human anti-plaet antibody,anti-PA Ab ELISA Kit
人抗胸腺細胞球蛋白(ATG)免疫試劑盒    Human anti-thymocyte globulin,ATG ELISA Kit
人抗信號識別顆粒54kDa蛋白(SRP54)抗體免疫試劑盒    Human anti signal recognition particle 54 kDa protein(SRP54)antibody ELISA kit
人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)免疫試劑盒    Human anti-cardiolipin antibody IgM,ACA-IgM ELISA Kit
人抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)免疫試劑盒    Human anti-cardiolipin antibody IgG,ACA-IgG ELISA Kit
人抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)免疫試劑盒    Human anti-cardiolipin antibody IgA,ACA-IgA ELISA Kit
大鼠胰島β細胞瘤細胞;RIN-m5F使用說明書人抗心肌抗體(AMA)免疫試劑盒    Human Anti-myocardial antibody,AMA ELISA Kit
人抗心肌β1受體(MB1R)自身抗體免疫試劑盒    Human myocardial β1 receptor (MB1R) autoantibody ELISA kit
人抗小鼠抗體(HAMA)免疫試劑盒    Human anti-mouse antibody,HAMA ELISA kit

 

 


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