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上海撫生實業有限公司
大鼠骨肉瘤細胞;UMR-106使用說明書細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
產品名稱 | 大鼠骨肉瘤細胞;UMR-106使用說明書 |
貨期 | 3-5天 |
發貨地 | 上海 |
細胞名稱 大鼠骨肉瘤細胞;UMR-106使用說明書
形態特性 上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 注射放射性同位素磷(32P)誘導產生的可移植性大鼠骨肉瘤克隆建立了UMR-106細胞株。 細胞對PTH,前列腺素及破骨甾體有響應。 對PTH的響應度,UMR-106比相關細胞株UMR-108(ATCC CRL-1663)要高。 蛋白激酶C的活化抑制ATP誘導的胞內鈣水平的升高。 起始骨肉瘤和克隆株都是University of Sheffield的T.J. Martin建立的。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
鈀碳加氫催化劑 NA
卵蛋白片 ALBUMIN, HORSE 9006-59-1
白凡士林 Vaseline
白藜蘆醇 Resveratrol 501-36-0
白屈菜酸 Chelidonic acid 99-32-1
百里酚;* ThyMol 89-83-8
百里酚藍 Thymol Blue 76-61-9
百里香*;麝香草*;*麩;百里* ThyMolphthalein ;DithyMolphthalide; 5′,5″-Diisopropyl-2′,2″-diMethylphenolphth- alein; 3,3-Bis(4-hydroxy-2-Meth-yl-5-isopropylphenyl)phthalide; 125-20-2
百里*二鈉絡合指示劑 NA 人抗二氫嘧啶酶相關蛋白5(DPYSL5/CRMP5)抗體免疫試劑盒 Human anti dihydropyrimidinase-related protein 5(DPYSL5/CRMP5)antibody ELISA kit
人抗多發性肌炎硬皮病抗體(PM-Scl/PM-1)免疫試劑盒 Human polymyositis-sclerosis antibody,PM-Scl/PM-1 ELISA Kit
人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)免疫試劑盒 Human Anti-proteinase 3 antibody IgG,PR3 Ab-IgG ELISA Kit
人抗單鏈DNA(ssDNA)抗體/變性DNA抗體免疫試劑盒 Human single stranded DNA (ssDNA)Antibody ELISA Kit
人抗單核細胞抗體(AMA)免疫試劑盒 Human anti-Monocyte antibody,AMA ELISA Kit
人抗促卵泡素抗體(Anti FSH Ab)免疫試劑盒 Human Anti FSH Ab ELISA Kit
人抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)免疫試劑盒 human thyroid stimulating hormone receptor antidoby,TRAb ELISA Kit
人抗補體1q抗體(anti-C1q-antibody)免疫試劑盒 Human anti-C1q-antibody ELISA Kit
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