中國倉鼠卵巢細(xì)胞（亞系克隆）；CHO-HCV-NS4B復(fù)蘇來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
| 產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
| 中國倉鼠卵巢細(xì)胞（亞系克隆）；CHO-HCV-NS4B復(fù)蘇 | 貼壁生長 | 上海 | 3－5天 |
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 CHO-HCV-NS4B細(xì)胞整合有丙型肝炎病毒的NS4B基因，能穩(wěn)定表達(dá)NS4B蛋白，是HCV基礎(chǔ)研究的*摸型。它由武漢大學(xué)病毒學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室郭佳博士于2008年構(gòu)建并保存。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C20
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
過氧二硫酸鉀 NA
過氧化-2-丁酮（*） 2-Butanone peroxide 1338-23-4
過氧化鋇（*） Barium peroxide 1304-29-6
過氧化二苯甲酰 97％ (dry wt.), wet with 25％ water Benzoyl peroxide 94-36-0
叔丁基過氧化物 Di-tert-butyl peroxide 110-05-4
過氧化二異丙苯;過氧化二枯茗;二枯茗過氧;硫化劑 DCP DicuMyl peroxide;Bis(α,α-diMe- thylbenzyl) peroxide;Bis(1-Methyl-1-phenylethyl)peroxide;Di(α,α-diMethylbenzyl)peroxide;CuMyl peroxide 80-43-3
過氧化鈣（*） Calcium peroxide 1305-79-9
過氧化環(huán)己酮（*） 1-Hydroperoxycyclohexyl-1-hydroxycyclohexyl peroxide 12262-58-7
過氧化氫30％(*);二氧化氫;二氧化二氫 Hydrogen Peroxide Concentrate 7722-84-1
叔丁基*（+4℃） tert-Butyl hydroperoxide 75-91-2人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)免疫試劑盒 Human ReverseTri-iodothyronine,rT3 ELISA Kit
人法尼基二磷酸法尼基轉(zhuǎn)移酶1(FDFT1)免疫試劑盒 Human farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1,FDFT1 ELISA Kit
人法尼醇X受體(FXR)免疫試劑盒 Human farnesoid X receptor,FXR ELISA Kit
人二酰基甘油(DAG/DG)免疫試劑盒 Human diacyl glycerol,DAG/DG ELISA Kit
人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)免疫試劑盒 Human dipeptidyl peptldase Ⅳ,DPPⅣ ELISA Kit
人二氫嘧啶脫氫酶[NADP+](DPYD)免疫試劑盒 Human Dihydropyrimidine dehydrogenase[NADP+](DPYD)ELISA kit
人二氫嘧啶酶樣3(DPYSL3)免疫試劑盒 human dihydropyrimidinase-like 3,DPYSL3 ELISA Kit
人二氫嘧啶酶樣2(DPYSL2)免疫試劑盒 human dihydropyrimidinase-like 2,DPYSL2 ELISA Kit
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