貓腎細胞；CRFK復蘇來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
| 產品名稱 | 生長特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
| 貓腎細胞；CRFK復蘇 | 貼壁生長 | 上海 | 3－5天 |
細胞名稱
形態(tài)特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 此細胞不含牛病毒性痢疾(BVD)病毒。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 新生牛血清，10%
傳代方法 1：2~1：8
傳代情況 P188
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
人白介素-12受體(IL-12R)免疫試劑盒 Human Interleukin 12 receptor,IL-12R ELISA kit
人白介素12(IL-12/P70)免疫試劑盒 Human Interleukin 12,IL-12/P70 ELISA KIT
人白介素12(IL-12/P40)免疫試劑盒 Human IL-12/P40 ELISA KIT
人白介素11(IL-11)免疫試劑盒 Human Interleukin 11 ELISA KIT
人白介素10(IL-10)免疫試劑盒 Human IL-10 ELISA KIT
人白喉抗體(Diphtheria Ab)免疫試劑盒 Human Diphtheria antibody ELISA Kit
人癌基因蛋白質p190/bcr-abl 免疫試劑盒 Human Oncogene Protein p190/bcr-abl ELISA Kit
人阿立新A(Orexin A)免疫試劑盒 Human Orexin A ELISA Kit
人κB抑制蛋白激酶(IKK)免疫試劑盒 Human I kappa B kinase,IKK ELISA kit氯化苦(劇毒) NA
氯化亞汞 MERCUROUS CHLORIDE 10112-91-1
氯化亞鐵 Ferrous chloride 7758-94-3
氯化乙酰* Acetylcholine Chloride 60-31-1
氯化乙酰甲*，98％ Methacholine Chloride (AS) 62-51-1
氯化乙酰硫代*(-20℃) ACETYLTHIOCHOLINE CHLORIDE 6050-81-3
氯乙酰氯（*） Chloroacetyl chloride 1979/4/9
卵黃氯化鈉瓊脂 Egg-Yolk Salt Agar B
卵黃營養(yǎng)強化50％ （+4℃） NA
*吐溫-80營養(yǎng)瓊脂 Lecithin Tween-80 Nutrient Agar
