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兔腎細(xì)胞;RK13復(fù)蘇

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更新時(shí)間:2017-02-13 12:13:12瀏覽次數(shù):411次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

兔腎細(xì)胞;RK13復(fù)蘇現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!

詳細(xì)介紹

兔腎細(xì)胞;RK13復(fù)蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

細(xì)胞名稱  兔腎細(xì)胞;RK13復(fù)蘇
形態(tài)特性   上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性  貼壁生長(zhǎng)
特征特性   RK13細(xì)胞初期建系于1959年,衍生于5周齡兔的*消化腎細(xì)胞。該細(xì)胞系對(duì)風(fēng)疹病毒(Rubella virus)敏感,病毒感染產(chǎn)生致細(xì)胞病變(CPE)。研究發(fā)現(xiàn)RK13細(xì)胞可作為多種病毒的敏感宿主,支持B病毒、單純皰疹病毒(Herpes simplex virus)、偽狂犬病毒(Pseudorabies virus)、痘苗病毒(Vaccinia virus)、兔痘病毒(Rabbitpox virus)、粘液瘤病毒(Myxoma virus)和猴腺病毒(Simian adenoviruses)的增殖。另外 
培養(yǎng)條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況  C186
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)  陰性
STR   STR鑒定
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  A類

產(chǎn)品名稱生長(zhǎng)特性發(fā)貨地貨期
貼壁生長(zhǎng)上海3-5天

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
人B細(xì)胞生長(zhǎng)因(BCGF)免疫試劑盒    Human B cell growth protein,BCGF ELISA Kit
人B細(xì)胞淋巴瘤因6(Bcl6)免疫試劑盒    Human Bcl6 ELISA Kit
人B細(xì)胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)免疫試劑盒    Human Bcl-xl ELISA Kit
人B細(xì)胞連接蛋白(BLNK)免疫試劑盒    Human BLNK ELISA Kit
人B細(xì)胞活化因受體(BAFF-R)免疫試劑盒    Human BAFF-R ELISA Kit
人B細(xì)胞活化因(BAFF)免疫試劑盒    Human BAFF ELISA Kit
人B細(xì)胞κ 輕肽基因增強(qiáng)核因抑制因ε(NFKBIE)免疫試劑盒    Human NFKBIE ELISA Kit
人B群鏈球菌多糖抗體(IgG)免疫試劑盒    Human Anti-Group B Streptococcal Type III Capsular Antibody IgG ELISA Kit
人B-淋巴細(xì)胞趨化因1(BLC-1/CXCL13)免疫試劑盒    Human B-Lymphocyte Chemoattractant 1,BLC-1 ELISA Kit*基硅甲基鋰    (TRIMETHYLSILYL)METHYLLITHIUM    1822-00-0
*基硅烷基三氟磺酸酯    Trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate    27607-77-8
甲基三辛基氯化銨;三辛基甲基氯化銨    MethyltrioctylaMMoniuM chloride    5137-55-3
三正辛基膦 90%    TRI-N-OCTYLPHOSPHINE    4731-53-7
三溴酚    2,4,6-Tribromophenol    118-79-6
溴化磷(III)    Phosphorus tribromide    7789-60-8
三氧化二鈷    COBALT(III) OXIDE BLACK    1308-04-9
三氧化二硼    Boron oxide    1303-86-2
三氧化二銻    Diantimony trioxide    1309-64-4

 

 


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