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上海撫生實業(yè)有限公司
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所 在 地上海市
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更新時間:2017-02-13 12:27:02瀏覽次數(shù):802次
聯(lián)系我時,請告知來自 智慧城市網幼兔腎上皮樣細胞特性現(xiàn)貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!
幼兔腎上皮樣細胞特性來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
產品名稱 | 生長特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
幼兔腎上皮樣細胞特性 | 貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
細胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一出生三天的幼兔的正常腎組織。2014年由中科院昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶 無
染色體
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)免疫試劑盒 Human Collagen Type Ⅰ,Col Ⅰ ELISA Kit
人1型1-磷酸鞘氨醇受體(S1P1)免疫試劑盒 Human S1P1 ELISA Kit
人17-酮類固醇(17-KS)免疫試劑盒 Human 17-ketosteroids,17-KS ELISA Kit
人17-羥孕烯醇酮免疫試劑盒 Human 17-Hydroxypregnenolone ELISA Kit
人11β羥類固醇脫氫酶1型(11β-HSD1)免疫試劑盒 Human 11β-HSD1 ELISA kit
人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨(1,5-AG)免疫試劑盒 Human 1,5-anhydroglucitol(1,5-AG)ELISA Kit
人1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)免疫試劑盒 Human inositol 1,4,5,-trisphosphate(IP3)ELISA kit
人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)免疫試劑盒 Human 1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPG ELISA Kit
人1,25二羥基*3(1,25 DHVD3)免疫試劑盒 Human 1,25-dihydroxyvitamin D3,1,25-dihydroxyvitamin D3 ELISA kit雙組份丙烯酰胺混合物 NA
雙組份溶劑 NA
水(防暴瓶) Water 7732-18-5
Tris飽和酚 BUFFER SOLUTION PH = 6,00 (20 °C) (POTASSIUM DIHYDROGEN PHOSPHATE/SODIUM HYDROXIDE)
水合肼100% NA
水合肼;肼,水合;水合聯(lián)氨;含水聯(lián)氨;含水肼 Hydrazine hydrate;DiaMide hydrate 7803-57-8
* Chloral hydrate 302-17-0
順丁烯二酸二甲酯 Dimethyl maleate 624-48-6
順丁烯二酰肼 3,6-Dihydroxypyridazine 123-33-1
順丁烯二酸酐;失水蘋果酸酐;2,5-呋喃二酮;馬來酸酐;順酐;二氫-2,5-二氧代呋喃;馬來酐;順丁二酸酐 MA;cis-Butenedioic anhydride;Toxilic anhydride;2,5-Furandione 108-31-6
順式-1,2,3,6-四氫鄰苯二甲酰亞胺 cis-1,2,3,6-Tetrahydrophthalimide 27813-21-4
順式六氫苯二甲酸酐 CIS-1,2-CYCLOHEXANEDICARBOXYLIC ANHYDRIDE 13149-00-3
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