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細胞培養(yǎng)基幾種添加劑分析

閱讀:254發(fā)布時間:2016-12-12

細胞株培養(yǎng)基中各種添加劑:
1. L-*是細胞生長的必須氨基酸,為培養(yǎng)的細胞提供重要的能量來源。脫掉氨基后,L-*可作為培養(yǎng)細胞的能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-*在溶液中經(jīng)過一段時間后會降解,降解率隨保存溫度而變。L-*的降解導(dǎo)致氨的形成,而氨對于一些細胞具有毒性。
2.GlutaMAX-I 即谷*二肽,是一個L-*的衍生物,其不穩(wěn)定的alpha-氨基用L-*來保護。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-*供利用。GlutaMAX-I二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有zui小的降解,如果在相同條件下,L-*幾乎*降解。

3.培養(yǎng)基中使用了NaHCO3-CO2緩沖系統(tǒng),并采用開放培養(yǎng),使細胞代謝產(chǎn)生的CO2及時溢出培養(yǎng)瓶,再通過穩(wěn)定調(diào)節(jié)溫箱中CO2濃度(5%),與培養(yǎng)基中的NaHCO3處于平衡狀態(tài),從而調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的PH值。
4.NEAA(非必需氨基酸)是含幾種非必需氨基酸的合劑,添加到的原培養(yǎng)基不同,NEAA也有不同的種類,比如添加至MEM的NEAA,含L-Alanine、L-Asparagine、 L-Aspartic Acid、L-Glutamic Acid、L-Glycine、L-Proline、L-Serine。
5.氯化鈣對成骨細胞培養(yǎng)有毒性,所以成骨細胞的培養(yǎng)基中應(yīng)不含氯化鈣。
6..酚紅在培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。酚紅本身對生物制品質(zhì)量并不會產(chǎn)生影響,可以通過純化技術(shù)去除,但酚紅在無血清培養(yǎng)基可能帶來胞內(nèi)鈉/鉀失衡,影響細胞生長,當然這種作用能被血清所中和或減輕。酚紅并不是培養(yǎng)基中必需的一種成分,很多國外的疫苗或抗體企業(yè)在過程中都使用無酚紅培養(yǎng)基。
7.丙酮酸鈉可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源,盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源,但是,如果沒有葡萄糖的話,細胞也可以代謝丙酮酸鈉。

8.HBS和 EBS 的主要差別在于*的水平,在Eagle′s (2.2g/L)中比在Hanks′ (0.35g/L) 中高。*需用高水平的CO2平衡,以維持溶液的PH值。Eagle′s液在空氣水平的CO2 中,溶液會變堿,Hanks′液在CO2培養(yǎng)箱中會變酸。如果希望在CO2培養(yǎng)箱中保存組織,需要用Eagle′s液,。如果僅僅是清洗將要在細胞培養(yǎng)基中儲存的組織,用Hanks′液就可以了。
9.由于大多數(shù)細胞適宜pH為7.2-7.4,偏離此范圍可能對細胞生長將產(chǎn)生有害的影響。但各種細胞對pH的要求也不*相同,原代培養(yǎng)細胞一般對pH變動耐受差,無限細胞系耐受力強。但總體來說,細胞耐酸性比耐堿性強一些。在配制培養(yǎng)用液時,需要注意一點:培新配的培養(yǎng)基在經(jīng)過0.10um或0.22um濾膜過濾時,溶液的pH還會向上浮動0.2左右。
10.一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+ 作為pH 的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細胞培養(yǎng)時應(yīng)使用的CO2濃度。當培養(yǎng)基中NaHCO3 含量為每公升3.7g時,細胞培養(yǎng)時應(yīng)使用10% CO2;當培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g 時,則應(yīng)使用5%CO2培養(yǎng)細胞。
11.HEPES溶液:是一種弱酸,主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變動。在開放式培養(yǎng)條件下,觀察細胞時培養(yǎng)基脫離了 5%CO2的環(huán)境,CO2氣體迅速逸出,pH迅速升高,若加了HEPES,此時可以維持pH7.0左右。一般在進行克隆化培養(yǎng)時要添加HEPES。
6-氨基吡啶硼酸    CAS號:    851524-96-4
2-二叔丁基磷-3,4,5,6-四甲基-2',4',6'-三異丙基聯(lián)苯    CAS號:    857356-94-6
5-甲酰基吡啶-3-硼酸酯    CAS號:    848093-29-8
環(huán)丁基硼酸    CAS號:    849052-26-2
1-(叔丁氧羰基)-2-吡咯烷酮    CAS號:    85909-08-6
2-氟-4-甲酰基苯硼酸    CAS號:    871126-22-6
3-氯苯甲醇    CAS號:    873-63-2
3-(3,5-二氟苯基)-1H-吡唑-4-甲醛    CAS號:    875664-59-8
4-氰基苯乙腈    CAS號:    876-31-3
(R)-1-(3-甲氧基苯基)乙胺    CAS號:    88196-70-7
    CAS號:    884-36-6
2-溴-6-甲基-異*    CAS號:    884494-71-7
3-(1,3-噻唑-2-基)苯甲醛    CAS號:    885465-97-4
    CAS號:    886362-04-5
    CAS號:    886362-06-7
    CAS號:    886362-46-5
6-甲基-2-(4-甲基苯基)咪唑[1,2-a]吡啶    CAS號:    88965-00-8
2-氨基-4-叔丁基噻唑    CAS號:    74370-93-7
    CAS號:    7635-29-2
細胞株

 


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