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上海邦景實業有限公司
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閱讀:818發布時間:2017-1-6
原代細胞細胞培養中的微生物污染種類可分成細菌、支原體、真菌和病毒污染。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室環境不佳、污染之胎牛血清和污染之細胞等。細菌、支原體等微生物污染在細胞培養中有哪些特點?
1、細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據感染細菌的不同,可有不同的外形,培養液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。
2、支原體:黑色的,好象多為多形,培養液一般培養液一般會渾濁,原體感染,國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測,而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后,細胞病變不很明顯,只是慢慢死。
3、真菌:一般培養液清亮,不變色,鏡下有絲狀物,有些真菌開始很像死細胞碎片,只是它很多很多的小塊很清楚,象珊瑚狀,不象細胞碎片分不清,慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢,不象細菌那么容易被發現,但是一旦發現有它的存在細胞就被污染了,也很難救活了。
4、病毒:組織細胞培養過程中,如果沒有除去潛在的病毒,就會產生病毒污染。目前,從原代猴腎細胞的培養中已發現不少于20種血清性病毒。 盡管病毒污染的細胞不影響原代培養,但疫苗是不安全的。因此,潛在病毒是細胞大量和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。
那么確定細胞受到哪種微生物污染之后,把污染細胞與其它細胞系隔離開,用實驗室消毒劑消毒培養器皿和超凈臺,檢查HEPA過濾器。
原代細胞高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細胞系有毒性,因而,做劑量反應實驗確定抗生素和抗霉菌素產生毒性的劑量水平。這點在使用抗生素如*和抗霉菌素如泰樂菌素時尤其重要。
L-肌肽(5772
HT-5(579
EPA;順-5,8,11,14,17-十二碳五烯酸(5978
D-*(5457
DL-薄荷醇(5 62
DHA;順-4,7,10,1 ,16,19-二十二碳六烯酸(5979
D-(--奎寧酸;右旋奎寧酸(5285
8-甲氧基補骨脂素(花椒毒素(5458
7-甲氧基香豆素(5966
6-氧嘌呤(5777
6-生物蝶呤(5810
6,7二甲氧基香豆素(5909
5-羥甲基糠醛(5 51
5-羥基色胺鹽酸鹽(5791
原代細胞
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