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技術(shù)文章

干細胞注意事項

閱讀:486發(fā)布時間:2017-8-28

干細胞注意事項
⒈ 正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
⒉ 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
⑴ 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。當前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
⑵ 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
⑶ 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法"(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
⑷ 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是當前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
干細胞HOF    人卵巢成纖維細胞    5 x 10^5 cells/vial
HAMSC    人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細胞    5 x 10^5 cells/vial
HCMSC    人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細胞    5 x 10^5 cells/vial
HMSC-bm    人骨髓間充質(zhì)干細胞    5 x 10^5 cells/vial
HMSC-ad    人脂肪間充質(zhì)干細胞    5 x 10^5 cells/vial
HMSC-hp    人肝臟間充質(zhì)干細胞    5 x 10^5 cells/vial
HUMSC    人臍帶間充質(zhì)干細胞    5 x 10^5 cells/vial
HPMSC    人肺間充質(zhì)干細胞    5 x 10^5 cells/vial
HVMSC    人脊柱間充質(zhì)干細胞    5 x 10^5 cells/vial
HUVEC    人臍靜脈內(nèi)皮細胞    5 x 10^5 cells/vial
HUAEC    人臍動脈內(nèi)皮細胞    5 x 10^5 cells/vial
HUVSMC    人臍靜脈平滑肌細胞    5 x 10^5 cells/vial
HUASMC    人臍動脈平滑肌細胞    5 x 10^5 cells/vial
RPC    大鼠垂體細胞    5 x 10^5 cells/vial
RMC    大鼠腦膜細胞    5 x 10^5 cells/vial
RN-r    大鼠腦脊神經(jīng)元    1 x 10^6 cells/vial
RN-c    大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元    1 x 10^6 cells/vial
RGC    大鼠顆粒細胞    1 x 10^6 cells/vial
RN-h    大鼠海馬神經(jīng)元    1 x 10^6 cells/vial
RN-sn    大鼠黑質(zhì)神經(jīng)元    1 x 10^6 cells/vial
RN-s    大鼠紋狀體神經(jīng)元    1 x 10^6 cells/vial
RN-vsc    大鼠腹脊髓神經(jīng)元    1 x 10^6 cells/vial
RN-dsc    大鼠背脊髓神經(jīng)元    1 x 10^6 cells/vial
ROPC    大鼠少突膠質(zhì)前體細胞    5 x 10^5 cells/vial
RSC    大鼠雪旺細胞    5 x 10^5 cells/vial
RPNF    大鼠周神經(jīng)成纖維細胞    5 x 10^5 cells/vial
RA    大鼠星形膠質(zhì)細胞    5 x 10^5 cells/vial
RA-c    大鼠小腦星形膠質(zhì)細胞    5 x 10^5 cells/vial
RA-h    大鼠海馬趾星形膠質(zhì)細胞    5 x 10^5 cells/vial
RM    大鼠小膠質(zhì)細胞    5 x 10^5 cells/vial
RLF    大鼠淋巴成纖維細胞    5 x 10^5 cells/vial
RPAEpiC    大鼠肺泡上皮細胞    5 x 10^5 cells/vial
RRTEpiC    大鼠腎小管上皮細胞    5 x 10^5 cells/vial
RHSteC    大鼠肝星形細胞    5 x 10^5 cells/vial
RCM    大鼠心肌細胞    1 x 10^6 cells/vial
RMSC    大鼠間充質(zhì)干細胞-骨髓    5 x 10^5 cells/vial
MPC    小鼠垂體細胞    5 x 10^5 cells/vial干細胞

 


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