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細胞株樣品收集

閱讀:267發布時間:2017-10-30

細胞株樣品收集:
1. 血清:全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集血液的試管應為一次性的無熱原,無內毒素試管。
2. 血漿:抗凝劑推薦使用EDTA.Na2,樣品采集后30分鐘內于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,高血脂樣品。
3. 細胞培養上清:取細胞培養上清于1000×g離心20分鐘,除去雜質及細胞碎片。取上清檢測。
4. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,以去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將*碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣本對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
5. 其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測.
6. 樣品應清澈透明,懸浮物應離心去除。
7. 樣品收集后若不及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃/-80℃冰箱內,避免反復凍融,1-6月內檢測,4℃保存的應在1周內進行檢測。
8. 如果您的樣本中檢測物濃度高于標準品zui高值,請根據實際情況,做適當倍數稀釋(建議先做預實驗,以確定稀釋倍數)。
細胞株T/E    */EDTA消化液    100 ml
TNS    *中和液    100 ml
NECDS     非酶細胞裂解液    100 ml
CFM    細胞凍存液    50 ml
SF-CFM    無血清細胞凍存液    50 ml
TB    臺盼藍    50 ml
DPBS    磷酸鹽緩沖注    500 ml
HBSS    *    500 ml
PLL    多聚賴氨酸 1 mg/ml    1 ml
PLL    多聚賴氨酸10 mg/ml    1 ml
FBS    胎牛血清    500 ml
P/S    */*溶液    5 ml
P/S    */*溶液    100 ml
AMS    抗真菌溶液    50 ml
ABAMS    抗霉菌溶液    50 ml
CCGW    細胞培養超純水    500 ml
MDS    肌細胞分離液    100 ml
BPE    牛腦垂體提取物    25 mg
BPE    牛腦垂體提取物    100 mg
ITS    胰島素鐵硒傳遞蛋白 100x    10 ml
L-Gue    左旋*溶液 200 mM    100 ml
NEAA    非必需氨基酸 100X    100 ml
BPF    纖維粘連蛋白-牛源    1mg
Col    I 型膠原細胞檢測試劑盒    48 tests/48 well plate
Fibro    纖維母細胞粘附檢測試劑盒    48 tests/48 well plate細胞株

 


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