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免 DNA 提取 PCR 試劑盒100 次說(shuō)明書(shū)

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商

所  在  地上海市

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更新時(shí)間:2017-01-19 14:33:49瀏覽次數(shù):295次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

免 DNA 提取 PCR 試劑盒100 次說(shuō)明書(shū)運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細(xì)介紹

免 DNA 提取 PCR 試劑盒100 次說(shuō)明書(shū)產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶,內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專(zhuān)一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
免 DNA 提取 PCR 試劑盒100 次說(shuō)明書(shū)產(chǎn)品介紹:

合成建文庫(kù)用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)R坏?RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專(zhuān)一性引物 100 pmol 注意:隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標(biāo)記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段(如果使用隨機(jī)引物,將出現(xiàn)多個(gè)小片段)。

〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)絡(luò)合指示劑,測(cè)定鉍、鎘、銅、鎵、汞、銦、錳、〖鎳〗、〖鉛〗、釷、駝(III)、〖鋅〗、鑭系離子等。光度測(cè)定鈷、鉍、銅、鎵、銦、錳、鉬、鈮、〖鎳〗、鋨、〖鉛〗、鈀、銠、鈧、鉭、鈦、駝(Ⅲ)、釩和鑭系離子
〖保存〗:RT,避光
酸性藍(lán)1
〖英文名稱(chēng)〗:Acid blue 1;C.I. 42045;Patent Blue VF;Sulfan Blue;Food Blue 3;N-[4-[[4-(Diethylamino)phenyl](2,4-disulfophenyl)methylene]-2,5-cyclohexadien-1-ylidene]-N-ethyl-ethanaminium inner salt sodium salt
〖其他名稱(chēng)〗:食品藍(lán)3;藍(lán)VF;藍(lán)VF鈉鹽;4,4’-雙(二乙氨基)三苯脫水甲醇-2’’,4’’-二磺酸單鈉;酸性湖藍(lán)V;酸性湖藍(lán)VN150;五號(hào)藍(lán)鈉鹽;舒泛藍(lán);蘭VF
〖CAS號(hào)〗:129-17-9
C27H31N2NaO6S2=566.66
〖級(jí)別〗:IND
有效分光〖含量〗:≥50.0%
消光系數(shù)(λ635-641 nm In Water):≥50000
消光系數(shù)(λ408-414 nm):≥5300
消光系數(shù)(λ308-314 nm):≥7500
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:紫紅色至藍(lán)綠色或色粉末。溶于水
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。
〖保存〗:RT。保質(zhì)期5年
藍(lán)V
〖英文名稱(chēng)〗:Patent Blue V;Patent Blue V calcium salt;Acid Blue 3 calcium salt;Acid Blue V calcium salt;Food Blue 5;Patent Blue V
〖其他名稱(chēng)〗:C.I.藍(lán)V;酸性藍(lán)3 ;蘭V;藍(lán)V號(hào)鈣鹽;藍(lán)五號(hào)鈣鹽;酸性湖藍(lán)Ⅴ;酸性藍(lán)Ⅴ
〖CAS號(hào)〗:3536-49-0
.7~6.6

膠回收及 PCR 片段純化兩用試劑盒    AP 標(biāo)記的抗抗體
膠回收及 PCR 片段純化兩用試劑盒    AP 標(biāo)記的抗*抗體
BL21(DE3)pLysS 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞    HRP 標(biāo)記的抗抗體
包涵體微量純化試劑盒    HRP 標(biāo)記的抗*抗體
包涵體中量純化試劑盒    cDNA 第二鏈合成試劑盒
包涵體大量純化試劑盒    RIPA 裂解液 ( 強(qiáng) )
硅膠膜離心吸附柱 ( 小提 ) 收集管    RIPA 裂解液 ( 中 )
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)λDNA/HindIII    RIPA 裂解液 ( 弱 )
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)pBR322/MspI    NP-40 裂解液
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)pUC19/MspI    *干粉
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)λDNA/EcoR I    螢火蟲(chóng)熒光素
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)λDNA/BstE II    ATP 溶液,1mM
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)λ/EcoR I+ Hind III    Klenow 片段
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)pBR322/BstN I    乙酰化牛血清白蛋白
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)


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