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上海邦景實業有限公司
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即用型高保真 PCR 試劑盒9mL實驗方法運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。
即用型高保真 PCR 試劑盒9mL實驗方法產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶，內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提 供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
即用型高保真 PCR 試劑盒9mL實驗方法產品介紹：
合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現 1.1Kb 的片段（如果使用隨機引物，將出現多個小片段）。
質量吸收系數α2(λ2,pH 8.5,干樣)：100.0～132.0L/cm·g
〖干燥失重〗：≤3.0%
〖灼燒殘渣〗(以〖硫酸鹽〗計)：≤0.2%
乙醇溶解試驗：合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：紅棕色結晶性粉末。溶于乙醇、水、稀酸(黃色)和稀堿(紫色)。其0.1％乙醇溶液或0.04％鈉鹽水溶液用作指示劑
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)酸堿指示劑，pH 7.2(黃)～8.8(紫紅)； pH 2.0(橙色)～3.0(琥珀色)。
〖保存〗：RT
甲酚紅鈉鹽
〖英文名稱〗：Cresol Red sodium salt；o-Cresolsulfonphthalein sodium salt
〖其他名稱〗：鄰甲酚磺酰酞鈉鹽；鄰甲酚紅鈉鹽
〖CAS號〗：62625-29-0
C21H17NaO5S=404.41
〖級別〗：IND
純度：≥95.0%
氨基染膜液 兩管式 RT-PCR 試劑盒 (AMV-Taq)
半干法電轉液 ( 干粉 ) 單酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (Tth)
印跡膜抗體稀釋液 LAMP 擴增陽性對照
Western 印跡膜封膜液 (NC 膜和 PVDF 膜 ) *
Western 印跡膜洗膜液 鼻腔采樣拭子
一站式蛋白質非變性 PAGE 套裝 ( 高 pH) DNA 樣品采樣拭子
一站式蛋白質非變性 PAGE 套裝 ( 中 pH) * A
一站式蛋白質非變性 PAGE 套裝 ( 低 pH) * B
Tricine-SDS-PAGE 上樣液 百萬堿基動物 DNAout
Tricine-SDS-PAGE 上樣液 百萬堿基血液 DNAout
Tricine-SDS-PAGE 陽極電泳液 ( 干粉 ) Southern 血液 DNAout
Tricine-SDS-PAGE 陽極電泳液 ( 干粉 ) FTA 血片 DNAout
紅 ),6×( 非甘油 )
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