兩棲類和爬行類動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix100 次原理

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產(chǎn)品分類 品牌分類

  核酸擴(kuò)增產(chǎn)品

常用PCR引物

種屬鑒定PCR Mix

單細(xì)胞擴(kuò)增

其他擴(kuò)增試劑盒

LAMP擴(kuò)增

全基因組擴(kuò)增（WGA）

即用型RT-PCR

RT

即用型PCR

PCR成分及添加劑

全部產(chǎn)品列表

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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

兩棲類和爬行類動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix100 次原理運(yùn)輸及保存低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

兩棲類和爬行類動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix100 次原理產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
兩棲類和爬行類動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix100 次原理合成建文庫(kù)用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機(jī)引物，將出現(xiàn)多個(gè)小片段）。

〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)分光光度測(cè)定鈾和鈣。可在不同條件下與鈣、鋇、鎂、銅、〖鋅〗、〖鉛〗、〖鐵〗、鈷、〖鎳〗、鈹、鋁、釔、釷、鈰和銨等形成有色絡(luò)合物
〖保存〗：RT
偶氮氯膦mA
〖英文名稱〗：CPA-mA；Chlorophosphonazo mA
〖其他名稱〗：2-(4-氯-2-膦酸基苯偶氮)-7-(3-乙酰基苯偶氮)-1,8-二羥基萘-3,6-二磺酸
〖CAS號(hào)〗：86167-87-5
C24H18C1N4O12PS2=684.98
〖級(jí)別〗：顯色劑
對(duì)稀土金屬靈敏度試驗(yàn)：合格
比耳定律試驗(yàn)：合格
水溶解試驗(yàn)：合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：深紫紅色結(jié)晶性粉末。易溶于水，在中性和酸性溶液中呈紫紅色
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)在酸性介質(zhì)中與稀土元素形成藍(lán)色絡(luò)合物。用于低品位稀土元素的測(cè)定，低合金鋼、球墨鑄〖鐵〗中稀土總量和鎂的測(cè)定
〖保存〗：RT
偶氮氯膦mN
〖英文名稱〗：CPA-mN；Chlorophosphonazo mN
〖其他名稱〗：2-(4-氯-2-膦酸基苯偶氮)-7-(3-硝基苯偶氮)-1,8-二羥基萘-3,6-二磺酸
〖CAS號(hào)〗：77350-04-0
C22H15ClN5O13PS2=687.94
〖級(jí)別〗：顯色劑

轉(zhuǎn) Lectin 基因植物 PCR Mix   柱式細(xì)菌 RNAout
真菌種屬鑒定 PCR Mix 1   柱式血清血漿 DNAout
真菌種屬鑒定 PCR Mix 2   柱式血清血漿 RNAout
真菌種屬鑒定 PCR Mix 3   柱式血液 DNAout
真菌種屬鑒定 PCR Mix 4   柱式血液 DNAout
真菌種屬鑒定 PCR Mix 5   柱式血液 DNA-RNAout
真菌種屬鑒定 PCR Mix 6   柱式血液 mtDNAout，測(cè)序
真菌種屬鑒定 PCR Mix 7   柱式血液 RNAout
古細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 1   柱式藻類 RNAout
真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 2   柱式真菌 DNAout
古細(xì)菌 + 真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3   柱式真菌 RNA-DNA 雙提試劑盒
草桿菌 PCR Mix 4   柱式真菌 RNAout
高 GC 革氏陽(yáng)性細(xì)菌 PCR Mix 5   柱式植物 DNAout
鏈霉菌 PCR Mix 6   柱式植物 mtDNAout，測(cè)序
Poly r(A)   柱式植物 RNA-DNA 雙提試劑盒
Poly(I).Poly(C)   柱式植物 RNAout
Percoll   柱式植物 RNAout 2.0
gG(H+L)，

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