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上海邦景實業有限公司
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轉 ESPES 基因植物 PCR Mix100 次價格運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。
轉 ESPES 基因植物 PCR Mix100 次價格產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
轉 ESPES 基因植物 PCR Mix100 次價格合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。
3',6'-二氯熒光素
〖英文名稱〗:3',6'-Dichlorofluoran;Fluorescein dichloride
〖其他名稱〗:3ˊ,6ˊ-二氯熒光橙紅;3ˊ,6ˊ-二氯熒光紅;3ˊ,6ˊ-二氯熒光黃;3ˊ,6ˊ-二氯熒烷;氯化熒光素
〖CAS號〗:630-88-6
C20H10Cl2O3=369.2
〖級別〗:BR
純度:≥90%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:橙色粉末。溶于乙醇,不溶于水或酸
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT,保質期5年
3,3-二氨基聯苯胺四鹽酸鹽無水物
〖英文名稱〗:DAB·4HCL;3,3-Diamonobenzidine tetrahydrchloride;3,3',4,4'-Biphenyltetramine tetrahydrochloride
〖其他名稱〗:3,4,3′,4′-四氨基聯苯四鹽酸鹽;硒試劑;3,3-二氨基聯苯胺鹽酸鹽;(1,1'-聯苯)-3,3'4,4'-四胺四鹽酸鹽;鹽酸-3,3′-二氨基聯苯胺
〖CAS號〗:7411-49-6
C12H14N4?4HC1=360.11
〖級別〗:Reagent Grade
〖含量〗:≥98.0%
Red-Taq DNA 聚合酶 衣霉素溶液 ,5mg/mL
Long-Taq DNA 聚合酶 胰蛋白胨
miRNA cDNA *鏈合成試劑盒 * 1:250
dATP 溶液,2.5mM *,質譜
dTTP 溶液,2.5mM *干粉
dGTP 溶液,2.5mM *抑制劑
dCTP 溶液,2.5mM *抑制劑,10mg/mL
dCTP 溶液,100mM *消化液 ( 含 EDTA)
dITP 溶液,2.5mM *消化液 ( 無 EDTA)
dITP 溶液,100mM *,測序
兩管式 RT-PCR 試劑盒 (AMV-Taq) *抑制劑溶液,20mg/mL
單酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (Tth) 遺傳霉素
LAMP 擴增陽性對照 遺傳霉素 (G418) 干粉
菌 DNAout
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