轉 ESPES-NOs 基因植物 PCR Mix100 次實驗方法產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶，內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提 供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
轉 ESPES-NOs 基因植物 PCR Mix100 次實驗方法合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現 1.1Kb 的片段（如果使用隨機引物，將出現多個小片段）。
〖含量〗：≥95% (HPLC)
水分：≤4.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：黃色或橙色粉末，有吸濕性。能與各種抗體蛋白結合，結合后的抗體不喪失與一定抗原結合的特異性，并在堿性溶液中仍有強烈綠色熒光，加酸后析出沉淀，熒光消失，微溶于丙同、乙迷和石油醚。不溶于水。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。
〖保存〗：2～8℃，避光
二乙酸螢光素
〖英文名稱〗：FDA；Fluorescein diacetate；3-Oxospiro[isobenzofuran-1(3H),9'-[9H]xanthene]-3',6'-diyl diacetate；Diacetylfluorescein
〖其他名稱〗：二乙酸熒光素；熒光素二乙酸鹽；熒光素二乙酸酯；二乙酰熒光素；熒光素雙醋酸酯；醋酸熒光素；熒光胺雙乙酸鹽；3,6-二乙酸基熒光素
〖CAS號〗：596-09-8
C24H16O7=416.38
〖級別〗：試劑級
〖含量〗：≥97%
紅外光譜：Consistent with structure
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：白色或淺黃色結晶粉末。〖熔點〗200～203℃，zui大吸收波長 498nm
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)酯酶底物，用于組織化學檢驗。熒光基質。活細胞染色，用作細胞內相互作用及其(細胞)膜滲透性的研究。FDA可透過細胞膜并作為熒光素積蓄在活細胞內。由于熒光素較BCECF或Calcein的親水性低，因此熒光素從細胞中滲漏的量也高。FDA也可用于流式細胞儀。熒光素的激發和發射波長分別為488 nm和530 nm。
〖保存〗：-20℃，避光
二氯熒光素
〖英文名稱〗：Fluorescein dichloride；2′,7′-Dichlorofluorescein
〖其他名稱〗：2ˊ，7ˊ-二氯熒光素；2ˊ，7ˊ-二氯熒光黃；2',7'-二氯-3',6'-二羥基螺[異苯并呋喃-1(3H),9'-(9H)占噸]-3-酮；2,7-二氯-3,6-螢烷二醇
〖CAS號〗：76-54-0
C20H10Cl2O5=401.20
〖級別〗：試劑級
純度：≥95%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：黃色或橙褐色粉末或固體。〖熔點〗280℃，微溶于水 (0.1-1%)，微溶于DMSO，溶于甲醇和乙醇（乙醇溶解：25mg/ml）、堿
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)熒光指示劑。吸附指示劑，如以Ag-NO3滴定C1-點由黃綠色變為淡紅色
〖保存〗：RT，保質期4年
昆蟲細胞裂解液 一站式蛋白質非變性 PAGE 套裝 ( 高 pH)
細胞核蛋白提取試劑盒 一站式蛋白質非變性 PAGE 套裝 ( 中 pH)
動物線粒體總蛋白提取劑盒 一站式動物 mRNAout
高效農桿菌感受態細胞制備試劑盒 一站式平末端克隆試劑盒
YPD 液體培養基 一站式全血 mRNAout
YPG 液體培養基 一站式* TUNEL 試劑盒 (FITC/POD)
YPDG 液體培養基 一站式*檢測 TUNEL 試劑盒 (DAB 法 )
MAL 指示劑培養基 一站式乙酸 - 尿素 PAGE 電泳套裝
GAL 指示劑培養基 一站式*期 SDS-PAGE 電泳套裝 (>30KD)
酵母及產孢培養基 一站式*期 SDS-PAGE 電泳套裝 (2-30KD)
酵母產孢培養基 一站式真菌 mRNAout
超雜交液 (Oligo 探針 ) 一站式植物 mRNAout
超雜交液 ( 芯片 ) 一站式柱式 miRNAout
超雜交液 ( 原位雜交 ) 伊紅 Y 二鈉鹽，水溶性
脫脂奶粉 ( 雜交 ) 伊紅 Y, 醇溶性
鯡魚精 DNA 溶液 衣霉素
乙酰化牛血清白蛋白
