轉 Lectin 基因植物 PCR Mix100 次原理合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
轉 Lectin 基因植物 PCR Mix100 次原理按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現 1.1Kb 的片段（如果使用隨機引物，將出現多個小片段）。
產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶，內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提 供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
水溶解試驗：合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：白色或微粉紅色結晶粉末。水溶性試驗：100mg/10ml水
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)3,3',5,5'-四甲基聯苯胺 (TMB)是過氧化輕酶的底物。二氨基聯苯的非制癌替代物。
〖保存〗：2～8℃，避光，遠離金屬
3,3,5,5-四甲基聯苯胺終止溶液
〖英文名稱〗：TMB-Stop solution
〖級別〗：BR
產品描述：Upon addition of stop reagent solution to the reaction mix of peroxidase and TMB substrates. The resulting yellow chromogen is quanittated at 450nm. Stop solution is ordered separay
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：液體
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗
〖保存〗：2～8℃，避光
異硫酸熒光素
〖英文名稱〗：FITC；Fluorescein isothiocyanate；Fluorescein isothiocyanate isomer I；Fluorescein 5-isothiocyanate
〖其他名稱〗：異硫酸熒光橙紅；異硫酸熒光黃；異硫酸熒光紅；異硫酸熒光素酯；異硫酸熒光素異構體I；5-異硫酸熒光素；熒光素-5-異青酸酯；異硫酸熒光酯異構體；異硫酸熒光素（同分異構體I）；熒光素5-異硫酸鹽
〖CAS號〗：3326-32-7
C21H11NO5S=389.38
〖級別〗：人玻連蛋白 一站式 miRNA 尿素 -PAGE 電泳套裝
葡激酶 一站式 PCR-SSCP 套裝
PreScissiom 蛋白酶 一站式 RNA 電泳套裝
可逆性銅染試劑盒 一站式 SDS-PAGE 電泳套裝
可逆性鋅染試劑盒 一站式 TA 克隆試劑盒
糖蛋白 PAGE 染液 一站式 TA 克隆試劑盒 ( 含感受態(tài) )
脂蛋白 PAGE 染液 一站式 Tricine-SDS-PAGE 套裝
一站式乙酸 - 尿素 PAGE 電泳套裝 一站式 Western 印跡套裝 (AP 顯色法 )
免疫蛋白清除劑 一站式 Western 印跡套裝 (HRP 顯色法 )
磷酸化蛋白純化試劑盒 一站式磁珠法動物 mRNAout
糖蛋白蛋白純化試劑盒 一站式磁珠法全血 mRNA 提取試劑盒
脂蛋白純化試劑盒 一站式磁珠法真菌 mRNA 提取試劑盒
植物線粒體總蛋白提取試劑盒 一站式磁珠法植物 mRNAout
植物葉綠體蛋白提取試劑盒 一站式大提柱式 miRNAout
石蠟包埋組織蛋
