真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次實(shí)驗(yàn)步驟

返回列表頁

參考價

面議

具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號

品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所在地上海市

在線詢價收藏產(chǎn)品查看聯(lián)系電話

聯(lián)系方式：劉玲查看聯(lián)系方式

更新時間：2017-01-19 16:34:18瀏覽次數(shù)：485次

聯(lián)系我時，請告知來自智慧城市網(wǎng)

產(chǎn)品分類 品牌分類

  核酸擴(kuò)增產(chǎn)品

常用PCR引物

種屬鑒定PCR Mix

單細(xì)胞擴(kuò)增

其他擴(kuò)增試劑盒

LAMP擴(kuò)增

全基因組擴(kuò)增（WGA）

即用型RT-PCR

RT

即用型PCR

PCR成分及添加劑

全部產(chǎn)品列表

暫無信息

上海邦景實(shí)業(yè)有限公司

經(jīng)營模式：經(jīng)銷商

商鋪產(chǎn)品：9962條

所在地區(qū)：上海上海市

聯(lián)系人：劉玲（銷售部）

詢價 給他留言

產(chǎn)品簡介

真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次實(shí)驗(yàn)步驟運(yùn)輸及保存低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

詳細(xì)介紹

真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶，內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次實(shí)驗(yàn)步驟合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)Ｒ坏?RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標(biāo)記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機(jī)引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段（如果使用隨機(jī)引物，將出現(xiàn)多個小片段）。

*試紙
〖英文名稱〗：Phenolphthalein test paper
規(guī)格：100張/盒
pH變色范圍：8.2(無色)～10.0(紅色)
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：白色紙條。是將濾紙浸入配制好的*溶液中，經(jīng)浸漬、干燥、切條而得。遇酸無色，遇堿呈紅色
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)測定溶液的pH
〖保存〗：RT
*絡(luò)合指示劑
〖英文名稱〗：Phenolphthalexone；Phenolphthalein-3,3′-bis(methyliminodiacetic acid)；3,3′-Bis-｛［bis(carboxymethyl)amino］methyl｝phenolphthalein
〖其他名稱〗：*-3,3’-雙-(亞甲氨基二乙酸)
〖CAS號〗：25296-54-2
C30H28N2O12=608.56
〖級別〗：IND
對鍶絡(luò)合試驗(yàn)：合格
水溶解試驗(yàn)：合格
游離*：合格
〖灼燒殘?jiān)剑?le;1.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：近似白色或微黃色粉末。溶于乙醇、乙迷和氨水，不溶于水
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)絡(luò)合指示劑，測定鈣

G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物   YPD 液體培養(yǎng)基
3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物   YPDG 液體培養(yǎng)基
RNase 抑制劑 ( 小鼠源 )   YPG 液體培養(yǎng)基
p19siRNA 結(jié)合蛋白    亞氨二乙酸介質(zhì)
p19miRNA 檢測試劑盒    亞精胺 ( 精脒 )
ATP 發(fā)光法細(xì)胞活力檢測試劑盒   亞精胺三鹽酸鹽
ADP/ATP 發(fā)光法細(xì)胞活力檢測試劑盒   亞硫酸氫鹽 DNA 修飾試劑盒
單細(xì)胞裂解液 (DNA)   亞硫酸鹽修飾的 DNA
單細(xì)胞裂解液 (RNA)   亞鐵 ( 三水合 )
單細(xì)胞懸浮液   *
胚胎裂解液   *
顯影定影套裝   *
顯影粉   鹽酸胍
定影粉   鹽酸胍溶液，8M
熒光尺   *
凋亡 DNAout   *干粉
( 低 pH)

以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé)，智慧城市網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。溫馨提示：為規(guī)避購買風(fēng)險，建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。