真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次實驗步驟產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶，內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提 供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次實驗步驟合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現 1.1Kb 的片段（如果使用隨機引物，將出現多個小片段）。
*試紙
〖英文名稱〗：Phenolphthalein test paper
規格：100張/盒
pH變色范圍：8.2(無色)～10.0(紅色)
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：白色紙條。是將濾紙浸入配制好的*溶液中，經浸漬、干燥、切條而得。遇酸無色，遇堿呈紅色
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)測定溶液的pH
〖保存〗：RT
*絡合指示劑
〖英文名稱〗：Phenolphthalexone；Phenolphthalein-3,3′-bis(methyliminodiacetic acid)；3,3′-Bis-｛［bis(carboxymethyl)amino］methyl｝phenolphthalein
〖其他名稱〗：*-3,3’-雙-(亞甲氨基二乙酸)
〖CAS號〗：25296-54-2
C30H28N2O12=608.56
〖級別〗：IND
對鍶絡合試驗：合格
水溶解試驗：合格
游離*：合格
〖灼燒殘渣〗：≤1.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：近似白色或微黃色粉末。溶于乙醇、乙迷和氨水，不溶于水
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)絡合指示劑，測定鈣
G(5´)ppp(5´)G 帽結構類似物 YPD 液體培養基
3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽結構類似物 YPDG 液體培養基
RNase 抑制劑 ( 小鼠源 ) YPG 液體培養基
p19siRNA 結合蛋白 亞氨二乙酸介質
p19miRNA 檢測試劑盒 亞精胺 ( 精脒 )
ATP 發光法細胞活力檢測試劑盒 亞精胺三鹽酸鹽
ADP/ATP 發光法細胞活力檢測試劑盒 亞硫酸氫鹽 DNA 修飾試劑盒
單細胞裂解液 (DNA) 亞硫酸鹽修飾的 DNA
單細胞裂解液 (RNA) 亞鐵 ( 三水合 )
單細胞懸浮液 *
胚胎裂解液 *
顯影定影套裝 *
顯影粉 鹽酸胍
定影粉 鹽酸胍溶液，8M
熒光尺 *
凋亡 DNAout *干粉
( 低 pH)
