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上海邦景實業有限公司
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磷酸蛋白染色試劑盒10 次實驗步驟運輸及保存 常溫運輸和保存,有效期一年。溶液 C 和溶液 D 使用前需要放-20℃預冷。
磷酸蛋白染色試劑盒10 次實驗步驟產品介紹:
磷酸蛋白染色試劑盒10 次實驗步驟規格及成分:
產品及特點:
蛋白質樣品的制備是 2D 電泳成功的關鍵,尤其是對植物材料,因為植物材料 不但有堅硬的細胞壁,還含有大量的、可以干擾 2D 電泳的物質(如多糖、脂類、 多酚、次生代謝物等)。本產品就是專門針對這一困難而開發,它有下列特點:
1. 可以處理各種植物材料(葉片、種子、果實等),包括新鮮或凍干的材料。
2. 操作簡單,只有振蕩和離心等簡單步驟。 3. 能有效去除植物樣品中常見的、干擾 2D 電泳的物質。
使用方法:
1、 稱取 0.1-0.5g 植物組織(如果是葉片,一般用 0.2g 即可;如果是含水分多的 果實,一般用 0.3-0.5g;如果是種子,一般用 0.1g 即可),放入液氮中研磨 成粉末。
2、 加入 1 mL 溶液 A,在冰上繼續研磨至成糊狀。注意:如果樣品富含蛋白酶, 還可以在溶液 A 中加入相應的蛋白酶抑制劑(自備)。
3、 將研磨液轉移到一個干凈的 1.5mL 塑料離心管中,顛倒混勻后 4℃ 15000g 離心 15 分鐘。
4、 將上清液轉移到一個新的 1.5mL 塑料離心管中。
5、 加入 100 uL 溶液 B,顛倒混勻。
6、 在冰上放置 15 分鐘或在-20℃冰箱過夜。
7、 4℃ 15000g 離心 15 分鐘,小心移棄上清液。
8、 向沉淀物加入 1mL -20℃預冷的溶液 C,震蕩混合。
9、 4℃ 15000g 離心 10 分鐘,移棄上清液。
10、重復步驟 8 和 9 一次
11、加入 1mL -20℃預冷的溶液 D,震蕩混合后 4℃ 15000g 離心 10 分鐘,去 凈上清液。
12、冷凍干燥 1~2 分鐘,沉淀即可放冰箱保存或加入 200uL 自備的等電聚焦上樣 液在室溫下(溫度不要超過 30℃)溶解 30 分鐘,再室溫 10000g 離心 2 分 鐘,將上清液轉移到一個新的 1.5mL 塑料離心管中。后續試驗包括 Bradford 蛋白定量和 2D 電泳。2D 電泳對蛋白上樣量要求十分嚴格,因此強烈建議用 戶在進行 2D 電泳前測定所得蛋白的濃度。
〖英文名稱〗:Azure II;,7-Bis(dimethylamino)phenothiazin-5-ium chloride mixt. with 3-(dimethylamino)-7-(methylamino)phenothiazin-5-ium chloride (1:1)
〖其他名稱〗:蔚藍II;天藍II;亞甲天青Ⅰ;3,7-雙(二甲基氨基)吩噻嗪-5-〖氯化物〗和3-(二甲基氨基)-7-(甲基氨基)吩噻嗪-5-〖氯化物〗混合物;氮雜脲II
〖CAS號〗:37247-10-2
C16H18ClN3S.C15H16ClN3S=625.68
〖級別〗:BS
生物染色試驗:合格
干燥失量:≤7.5%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:深綠色粉末。系*與天青I的等量混合物。溶于水呈深藍色,略溶于乙醇,微溶于氯方,不溶于乙迷。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
天青I
〖英文名稱〗:Azure B;Azure I;C.I. 52010;3-Methylamino-7-dimethylaminophenothiazin-5-ium chloride
〖其他名稱〗:天青B;亞甲天青;蔚藍I ;亞甲基天青;氮雜脲I;3-二甲基氨基-7-甲基氨基吩噻嗪-5-翁〖氯化物〗;天藍色B
〖CAS號〗:531-55-5
C15H16ClN3S=305.83
〖級別〗:BS
生物染色試驗:合格
〖干燥失重〗:≤7.5%
cDNA 第二鏈合成試劑盒 30 次 熒光胺
一管式雙鏈 cDNA 合成試劑盒 10 次 萘啶酮酸
Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL 5μg 彈性蛋白酶 ( 豬胰 )
6nt 隨機引物,0.5μg/μL 5μg 蛋白酶 K
10nt 隨機引物,0.5μg/μL 5μg DEAE 葡聚糖凝膠 A-50
6nt 隨機引物 ( 抗水解 ),0.5mM 100μL 5- 磷酸吡哆醛,一水
兩管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq) 50 次 蘇丹 B
兩管式 RT-PCR 試劑盒 (AMV-Taq) 50 次 對硝基苯磷酸二鈉鹽
單酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (Tth) 50 次 萘酚 AS-TR 磷酸鹽
50 次 氫
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