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怎么選擇合適的植物內參抗體?

閱讀:546發布時間:2018-12-25

在等量蛋白上樣的前提下,內參抗體對于正確解釋Western blot的結果至關重要。內參通常是蛋白質,在所檢測的細胞類型或者樣品中表現出穩定地高表達。

選擇作為內參的蛋白質具有與目標蛋白質不同的分子量,以便區分和量化目的蛋白條帶。那么怎么選擇合適的植物內參抗體呢?

首先考慮樣本來源,植物樣本需要選用植物細胞表達穩定的蛋白比如Actin或者Rubisco作為內參。

其次要考慮目的蛋白的分子量大小,我們*內參要與檢測的目的蛋白的分子量相差5kD以上,以區分目的蛋白條帶

后,考慮目的蛋白的表達定位,選擇對應的內參抗體,比如,全細胞、細胞核、線粒體等等。同時,在特定條件下,內參蛋白的表達會出現異常,應該將其考慮在內。

鑒于以上,Agrisera植物內參抗體尤為合適。優勢是適用于植物和藻類,而且在很多種屬類型中得到驗證,發表過很多文獻,應用范圍廣泛。

Agrisera植物內參抗體的分子量和表達定位:

組蛋白H3抗體應用于WB(擬南芥)和免疫細胞化學分析(蠶豆)的實例:

Agrisera植物內參抗體發表文章:

1. Overexpressing the H﹑rotein of the glycine cleavage system increases biomass yield in glasshouse and fieldゞrown transgenic tobacco plants. Plant Biotechnology Journal. 2018.

2. Extended darkness induces internal turnover of glucosinolates in Arabidopsis thaliana leaves. PLoS One. 2018.

3. The Arabidopsis transcription factor bZIP11 activates auxin-mediated transcription by recruiting the histone acetylation machinery. Nature Communications.2014

4. Co-localization of P-glycerate kinase, P-ribulokinase, ADP-glucose pyrophosphorylase and Rubisco activase with CF1 in pea leaf chloroplasts. Plant Science. 2009

5. Complementation of a mutation in CpSRP43 causing partial truncation of light-harvesting chlorophyll antenna in Chlorella vulgaris. Scientific Reports. 2017

6. Biology of a widespread unc*ted archaeon that contributes to carbon fixation in the subsurface. Nature Communications.2014

7. Tomato yellow leaf curl virus infection mitigates the heat stress response of plants grown at high temperatures. Scientific Reports. 2016


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