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北京方程嘉鴻科技有限公司
閱讀:194發(fā)布時間:2017-8-14
大鼠17-酮類固醇(17-KS)elisa檢測試劑盒北京現(xiàn)貨
中文名稱:大鼠17-酮類固醇(17-KS)
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大鼠載脂蛋白E(Apo-E)測定盒
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠17-酮類固醇(17-KS)水平。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入,再與HRP標記的結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中的濃度。
洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應步驟,但卻也決定著實驗的成敗。ELSIA就是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質(zhì),以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,而在洗滌時又應把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來??梢哉f在ELISA操作中,洗滌是zui主要的關鍵技術,應引起操作者的高度重視,操作者應嚴格按要求洗滌,不得馬虎。洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種,過程如下:(1)浸泡式 a.吸干或甩干孔內(nèi)反應液b.用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去)c.浸泡,即將洗滌液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖動,浸泡時間不可隨意縮短d.吸干孔內(nèi)液體。吸干應*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干e.重復操作c和d,洗滌3-4次(或按說明規(guī)定)。在間接法中如本底較高,可增加洗滌次數(shù)或延長浸泡時間。微量滴定板多采用浸泡式洗滌法。洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的結合是疏水性的,非離子型洗滌劑既含疏水基團,也含親水基團,其疏水基團與蛋白質(zhì)的疏水基團借疏水鍵結合,從而削弱蛋白質(zhì)與固相載體的結合,并借助于親水基團和水分子的結合作用,使蛋白質(zhì)回復到水溶液狀態(tài),從而脫離固相載體。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫20,其濃度可在0.05%-0.2%之間,高于0.2%時,可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗的靈敏度。(2)流水沖洗式 流水沖洗法zui初用于小珠載體的洗滌,洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時附接一特殊裝置,使小珠在流水沖擊下不斷地滾動淋洗,持續(xù)沖洗2分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可。浸泡式猶如盆浴,流水沖洗式則好比淋浴,其洗滌效果更為*,且也簡便、快速。已有實驗表明,流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時設法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔表面,洗滌效果更佳。
Perfectstart Taq master Mix (2X)是即用型的PCR反應預混液,體系中包含熱啟動的Perfectstart Taq DNA聚合酶,反應緩沖液,dNTP,PCR穩(wěn)定劑和增強劑,進行PCR反應時只需在mix中加入引物,模板和滅菌水即可,本產(chǎn)品能夠大大簡化 PCR操作,減少交叉污染,降低操作錯誤的風險,特別是使用熱啟動的聚合酶后擴增效率增高,擴增特異性增強,整個PCR 體系配置過程都可以在室溫下完成,得到的PCR產(chǎn)物在3‘端有一個dA的尾巴,因此可用于TA克隆。本產(chǎn)品需要保存于-20°C,如經(jīng)常使用可置于4°C。
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主營產(chǎn)品:胎牛血清,ELISA試劑盒,gibco胎牛血清10099141,胎牛血清16000-044,葡聚糖凝膠a-25,葡聚糖凝膠G-25,小鼠ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,白介素6試劑盒
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