人Ⅳ型膠原α1(COL4α1)測定試劑盒
中文名稱：人Ⅳ型膠原α1(COL4α1)測定試劑盒
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人Ⅳ型膠原α1(COL4α1)測定試劑盒水平。用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入，再與HRP標(biāo)記的結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中的濃度。
洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應(yīng)步驟，但卻也決定著實驗的成敗。ELSIA就是靠洗滌來達到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，而在洗滌時又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來。可以說在ELISA操作中，洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù)，應(yīng)引起操作者的高度重視，操作者應(yīng)嚴(yán)格按要求洗滌，不得馬虎。洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外，手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種，過程如下：（1）浸泡式 a.吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液b.用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去）c.浸泡，即將洗滌液注滿板孔，放置1-2分鐘，間歇搖動，浸泡時間不可隨意縮短d.吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干e.重復(fù)操作c和d，洗滌3-4次（或按說明規(guī)定）。在間接法中如本底較高，可增加洗滌次數(shù)或延長浸泡時間。微量滴定板多采用浸泡式洗滌法。洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的結(jié)合是疏水性的，非離子型洗滌劑既含疏水基團，也含親水基團，其疏水基團與蛋白質(zhì)的疏水基團借疏水鍵結(jié)合，從而削弱蛋白質(zhì)與固相載體的結(jié)合，并借助于親水基團和水分子的結(jié)合作用，使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀態(tài)，從而脫離固相載體。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫20，其濃度可在0.05%-0.2%之間，高于0.2%時，可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗的靈敏度。（2）流水沖洗式 流水沖洗法zui初用于小珠載體的洗滌，洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時附接一特殊裝置，使小珠在流水沖擊下不斷地滾動淋洗，持續(xù)沖洗2分鐘后，吸干液體，再用蒸餾水浸泡2分鐘，吸干即可。浸泡式猶如盆浴，流水沖洗式則好比淋浴，其洗滌效果更為*，且也簡便、快速。已有實驗表明，流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時設(shè)法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊板孔表面，洗滌效果更佳。
優(yōu)質(zhì)的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗一般均用板式點。本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用，兩者均有詳細(xì)的使用說明，嚴(yán)格遵照規(guī)定操作，必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果。
相關(guān)指標(biāo)：
小鼠催乳素(PRL)測定試劑盒Mus musculus (Mouse) Prolactin (PRL)
小鼠環(huán)加氧酶2(PTGS2)測定試劑盒Mus musculus (Mouse) Prostaglandin Endoperoxide Synthase 2 (PTGS2)
人Ⅳ型膠原α1(COL4α1)測定試劑盒
大鼠細(xì)胞色素P450家族成員1A1(CYP1A1)測定試劑盒Rattus norvegicus (Rat) Cytochrome P450 1A1 (CYP1A1)
人衰老關(guān)鍵蛋白2(FBLN2)測定試劑盒Homo sapiens (Human) Fibulin 2 (FBLN2)
小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPP4)測定試劑盒Mus musculus (Mouse) Dipeptidyl Peptidase IV (DPP4)
人羧肽酶E(CPE)測定試劑盒Homo sapiens (Human) Carboxypeptidase E (CPE)
人C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白3(C1QTNF3)測定試劑盒Homo sapiens (Human) C1q And Tumor Necrosis Factor Related Protein 3 (C1QTNF3)
小鼠細(xì)胞因子受體樣因子1(CRLF1)測定試劑盒Mus musculus (Mouse) Cytokine Receptor Like Factor 1 (CRLF1)
人10kDa熱休克蛋白1(HSP10)測定試劑盒Homo sapiens (Human) Heat Shock 10kDa Protein 1 (HSP10)
大鼠解整合素金屬蛋白酶10(ADAM10)測定試劑盒Rattus norvegicus (Rat) A Disintegrin And Metalloprotease 10 (ADAM10)
人胰彈性蛋白酶(ELA1)測定試劑盒Homo sapiens (Human) Elastase 1, Pancreatic (ELA1)
