ELISA是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。
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Pig Complement Component 1, Q Receptor (C1qR1) ELISA
操作步驟:1. 編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)2. 加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。4. 配液:將 30(48T 的 20 倍)倍濃縮洗滌液加蒸餾水至 600ml 后備用5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。7. 溫育:操作同 3。8. 洗滌:操作同 5。9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A 50μl,再加入顯色劑 B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘10. 終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色) 。11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值) 。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。
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