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人白介素-3 (Human IL-3)檢測
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以上是elisa操作步驟,那么在elisa操作步驟的操作步驟中需要注意什么呢?下面是elisa實驗的注意事項:1.正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性.有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉.2.在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:固相載體的選擇、包被抗體(或抗原)的選擇、酶標記抗體工作濃度的選擇、酶的底物及供氫體的選擇1、要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%.可用水和電子天平進行確定.但有專業人員進行矯正.2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支.吸取不同的液體后,要更換槍頭.即使是吸取標準品時.3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩定.4、實驗時,要使底物避光保存.5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確.6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差.7、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去.8、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體.也可以用酶標儀的晃動功能.9、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發.10、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*.沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干.11、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液.加入1/1000的疊氮鈉后可*保存.12、底物是光敏感的,要在臨用前現配.13、檢測前,要打開酶標儀,使之穩定10分鐘以上.14、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸.15、待檢樣品要澄清,否則會影響結果.16、溫浴時間應遵守試劑盒規定.17、應盡量做雙孔實驗,這樣才能保證數據的準確性.18、對結果有疑問的樣品要用其它方法進行確證.
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