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上海邦景實業有限公司
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閱讀:125發布時間:2017-07-24
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顆粒培養基試劑準備
1. 使用前將所有試劑平衡至室溫。
2. 洗液(Wash Buffer):如果濃縮液中已經形成結晶,平衡至室溫,并輕輕地搖晃直到結晶*溶解。加入去離子水或蒸餾水稀釋20ml濃縮洗滌液至500ml。
3. 底物溶液(Substrate Solution):顯色試劑A和B應該在使用前15min以等體積混合。避光保存。每孔需要200ul生成的混合物。
4. IL-6標準品(IL-6 Standard):使用5ml標準稀釋液RD5T(Calibrator Diluent RD5T)(適用于細胞培養上清液樣本)或標準稀釋液RD6F(Calibrator Diluent RD6F)(適用于血清/血漿樣本)重新配制IL-6標準品。重新配制的產品為300pg/ml貯存液。稀釋前允許將標準品至少輕輕攪拌15min。
5. 吸取適當的標準稀釋液667ul到100pg/ml EP管,500ul稀釋液到其它 EP管中。適用貯存液配制一系列的稀釋液(如下)。進行下一次轉移前充分地混勻各個EP管。沒有稀釋的標準品作為高標準。適當的標準稀釋液作為0標準(0pg/ml)。
測定步驟
使用前將所有IL-6ELISA試劑盒和樣本平衡至室溫。*所有的樣本、標準和對照測定雙份。
1. 準備所有的試劑和工作標準品。
2. 取下多余的微量培養板條,放回裝有干燥劑的錫箔袋中,重新密封。
3. 每孔加入100ul Assay Diluent RD1W。
4. 每孔依次加入100ul 標準品、樣本和對照。用橡皮條密封。室溫孵化2小時。記錄測定標準和樣本的分布。
5. 吸棄孔內液體,每孔400ul洗滌液,充分洗滌后*去除液體。在干凈的紙上拍干。反復洗滌4次。
6. 每孔加入200ul IL-6 Conjugate。用新的橡皮膏條密封。室溫溫浴2小時。
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