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上海邦景實業有限公司
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閱讀:130發布時間:2018-01-22
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即用型評板培養基基本程序為:
① 抗體包被 → 4℃過夜,洗滌三次、拋干
② 加入待檢抗原及一定量的酶標抗原(對照孔僅加酶標抗原)→ 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干
③ 加底物液 → 37℃ 20分鐘,加終止液
④ 用ELISA試劑盒檢測儀測定OD值。
被結合的酶標抗原的量由酶催化底物反應產生有色產物的量來確定,如果待檢溶液中抗原越多,被結合的標記抗原的量就越少,有色產物就減少,這樣根據有色產物的變化就可求出未知抗原的量。此法的優點在于快速、特異性高、且可用于小分子抗原及半抗原的檢測;其主要不足在于每種抗原都要進行酶標記,而且因為抗原的結構不同,還需應用不同的結合方法。此外試驗中應用酶標抗原的量較多。
檢測法為例介紹:
① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃過夜,洗滌三次、拋干
② 用200μl阻斷緩沖液進行封閉 → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干
③ 加工作量1:4稀釋被檢豬血清100μl → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干
④ 加100μl工作量兔抗AP2型血清 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干
⑤ 加100μl工作量豬抗兔IgG-HRP → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干
⑥ 加100μl OPD底物液 → 37℃ 20分鐘,加終止液
⑦ 用ELISA檢測儀測定OD值。
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