濕色培養基技術中的幾個問題
1、染色標本的固定
理想的免疫電鏡標本固定既要保存組織的抗原，又要具有良好的細胞超微結構。對于多數抗原，按常規電鏡技術固定標本會使其抗原性部分或*消失，因此，免疫電鏡常用一些特殊的固定液，如過碘酸鹽-賴氨酸-多聚甲醛固定液(PLP)、4%多聚甲醛固定液、多聚甲醛加低濃度的戊二醛固定液( PG)（相關試劑：戊二醛 25%溶液）及苦味酸-多聚甲醛固定液。我們在實際工作中發現，用1%多聚甲醛加0.01% -0.05%的戊二醛。此固定液不但配置簡單，而且效果滿意。當然，對于某些抗原性較強的標本，也可采用4%多聚甲醛加0.05%~0.5%的戊二醛固定。有的甚至可以直接采用常規電鏡固定液固定。
2、包埋劑的選擇
被檢組織采用包埋前或包埋后方法進行免疫染色，應視被標記抗原的情況而定。通常對僅檢測細胞表面的抗原選擇包埋前染色，這樣，不存在脫水、浸透及聚合對細胞抗原的破壞規包埋劑即可。相反，包埋后染色是在標本包埋后才進行免疫染色，對抗原常常造成較大的破壞，因此，應根據待檢抗原的性質選擇合適的包埋劑．以減少對抗原的破壞，提高陽性檢出率。Epon812為zui常用的電鏡包埋劑，它要求標本在包埋前必須*脫水，一般還需要在60℃聚合，因此，對抗原性往往有較大的破壞。我們在工作中采用低溫長時間聚合，45℃3天，日的減少聚合反應對抗原性保存的影響。為了減少對組織抗原性的破壞，以獲得很強的陽性染色結果，不少實驗室應用低溫包埋劑、透明合成樹脂及水溶性包埋劑（乙二醇甲酯）。通常在鐵蛋白或膠體金免疫電鏡技術的包埋后染色中，采用低溫包埋劑。
3、抗血清和探針
要獲得理想的免疫染色，選擇具有特異性高、親和力強的抗血清是實驗成功的首要條件。一般實驗所用的一抗都是通過市場購買（點擊查看：查找抗體），購置的一抗濃縮液在使用前須用抗體稀釋液稀釋，本文認為包埋后免疫電鏡染色用的一抗濃度要高于光鏡染色的使用濃度10~100倍。有時造成染色失敗的原因之一，就是因為把光鏡免疫組化染色的抗體作為一抗。
探針一般用于電鏡下觀察，通常使用膠體金顯示。膠體金探針既可以通過市場購買，也可以按Slot方法自己制備。一般制備的膠體金直徑為5nm，10nm，15nm幾種規格。
4、特異性吸附問題
免疫電鏡染色時，通常使用膠體金作為探針，然而膠體金是一種高度敏感的探針，如何克服背景，提高染色結果的特異性便成為膠體金免疫電鏡檢查的關鍵環節。使用效價高、特異性強的一抗和活性穩定、濃度適當的免疫金探針以及高質量稀釋度合適的抗體是克服背景污染、獲得理想標記結果的重要條件。隨著稀釋度的增加，污染蛋白的影響會逐漸減弱。一般在檢測某種新的抗原時，須通過方陣滴定來確定一抗及金標抗體的稀釋度。另外，還可以使用高鹽及含去污劑的緩沖液進行洗脫，以減少背景污染，通常在緩沖液中加入氯化鈉及Triton X-100，使其濃度分別為2.5%及1%即可。當然一抗和金探針時問的合適，也很重要。一般時間一抗24 h(4℃)，金探針常溫2h。在實驗中，我們常用正常羊血清(1:50-1:100)或1%牛血清白蛋白作為封閉劑，以阻斷非特異性吸附。
濕色培養基鳥苷酸解離抑制因子(GDI)ELISA試劑盒 ，英文名： GDI ELISA Kit
鳥苷酸結合蛋白4(Gbp4)ELISA試劑盒 ，英文名： Gbp4 ELISA Kit
鳥苷酸交換因子(GEF)ELISA試劑盒 ，英文名： GEF ELISA Kit
*脫羧酶(ODC)ELISA試劑盒 ，英文名： ODC ELISA Kit
*氨基甲酰轉移酶(OCT)ELISA試劑盒 ，英文名： OCT ELISA Kit
黏著斑激酶(FAK)ELISA試劑盒 ，英文名： FAK ELISA Kit
黏膜地址素細胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA試劑盒 ，英文名： MAdCAM-1 ELISA Kit
內質網蛋白29(ERP29/C12orf8/ERP28)ELISA試劑盒 ，英文名： ERP29/C12orf8/ERP28 ELISA Kit
內脂素/內臟脂肪素(visfatin)ELISA試劑盒 ，英文名： visfatin ELISA Kit
內脂素(visfatin)ELISA試劑盒 ，英文名： visfatin ELISA Kit
內臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒 ，英文名： vaspin ELISA Kit
內源性糖皮質激素(GC)ELISA試劑盒 ，英文名： GC ELISA Kit
內源性分泌型糖基化終產物受體(esRAGE)ELISA試劑盒 ，英文名： esRAGE ELISA Kit
內皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒 ，英文名： EL ELISA Kit
內皮抑素(ES)ELISA試劑盒 ，英文名： ES ELISA Kit
內皮型一氧化氮合酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒 ，英文名： eNOS-3 ELISA Kit
內皮型一氧化氮合酶(eNOS)ELISA試劑盒 ，英文名： eNOS ELISA Kit
內皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒 ，英文名： eNOS-3 ELISA Kit
內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒 ，英文名： eNOS ELISA Kit
內皮細胞特異分子-1(ESM-1)ELISA試劑盒 ，英文名： ESM-1 ELISA Kit
內皮糖蛋白(ENG/CD105)ELISA試劑盒 ，英文名： ENG/CD105 ELISA Kit
內皮素2(EDN2)ELISA試劑盒 ，英文名： EDN2 ELISA Kit濕色培養基
