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顯色培養(yǎng)基操作流程

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顯色培養(yǎng)基操作流程

1. 固體和半固體樣品：稱取 25 g 樣品置盛有 225 mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)杯內(nèi)，8000 r/min～10000 r/min 均質(zhì) 1 min～2 min，或放入盛有225 mL 稀釋液的無菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打 1 min～2 min，制成 1:10 的樣品勻液。

2 液體樣品：以無菌吸管吸取 25 mL 樣品置盛有 225 mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌錐形瓶瓶?jī)?nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無菌玻璃珠中，充分混勻，制成 1:10 的樣品勻液。

3 用 1 mL 無菌吸管或微量移液器吸取1:10 樣品勻液 1 mL，沿管壁緩慢注于盛有 9 mL 稀釋液的無菌試管中注意吸管或吸頭不要觸及稀釋液面，振搖試管或換用1 支無菌吸管反復(fù)吹打使其混合均勻，制成 1:100 的樣品勻液。

4 按 6.1.3 操作程序，制備 10 倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次，換用 1 次 1 mL 無菌吸管或吸頭。

5 根據(jù)對(duì)樣品污染狀況的估計(jì)，選擇 2 個(gè)～3 個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液液體樣品可包括原液，在進(jìn)行 10 倍遞增稀釋時(shí)，吸取 1 mL 樣品勻液于無菌平皿內(nèi)，每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿。同時(shí)，分別吸取 1 mL 空白稀釋液加入兩個(gè)無菌平皿內(nèi)作空白對(duì)照。

6 及時(shí)將 15 mL～20 mL 冷卻至 46 ℃的平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基可放置于 46  ±1  ℃℃恒溫水浴箱中保溫傾注平皿，并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使其混合均勻。


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