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玫瑰紅鈉瓊脂培養基的使用方法和注意事項

閱讀:172發布時間:2018-11-20

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【產品用途】

玫瑰紅鈉瓊脂培養基(顆粒培養基)供藥品和生物制品中霉菌和酵母菌的計數、分離和培養用。

【檢驗原理】

胨提供碳源和氮源;葡萄糖提供能源;磷suan二氫jia為緩沖劑;*提供必須的微量元素;玫瑰紅鈉作為選擇性抑菌劑可抑制細菌的生長,并可減緩某些霉菌因生長過快而導致菌落漫延生長;瓊脂是培養基的凝固劑。

【注意事項】

1、稱量時注意粉塵,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系統不適。

2、自制平板時需注意培養基的厚度,厚度過薄容易造成瓊脂水分保持性下降,開裂;因此,一般需要15-20mL(Φ90mm)體積培養基,平板培養基厚度至少為2mm。

【廢物處理】

檢測之后帶菌平板置于121℃下高壓滅菌30分鐘后處理。

使用方法(計數用法):

1、   稱取玫瑰紅鈉瓊脂培養基30.5g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至*溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌20min。

2、   檢樣的稀釋處理,略。

3、   根據對樣品污染情況的估計,選擇3個合適的稀釋度,分別在做10倍稀釋的同時,吸取1.0mL稀釋液于滅菌平皿中,每個稀釋度做2~3個平皿。

4、   將涼至45℃左右的培養基約15mL注入平皿中,待瓊脂凝固后,倒置于23~28℃溫箱中培養72h,對于菌落微小點計困難的平板可延續培養到4~5d再進行觀察計數。

5、   計數、報告:

(1)         計數:一般情況下,玫瑰紅鈉平板計點霉菌或酵母菌數,如在該平板上生長的細菌菌落數多于營養瓊脂平板上生長的菌落數時,則應同時點計細菌數,并將該菌數作為供試品的細菌數報告。固體供試品在玫瑰紅鈉瓊脂平板上點計霉菌落數,液體供試品則需在玫瑰紅鈉瓊脂平板上點計霉菌與酵母菌菌數;含蜂蜜及王漿的合劑需以玫瑰紅鈉平板的霉菌菌落數加上酵母膏粉胨葡萄糖瓊脂平板的酵母菌菌落數作為供試品的霉菌、酵母菌總數。

(2)         報告:通常選擇菌落數在30~100之間的稀釋級的平板計數,以該稀釋度的平均菌落數乘以稀釋倍數報告。

質量控制:

 玫瑰紅鈉瓊脂培養基傾注平皿后呈玫瑰紅色,下列菌株接種后23~28℃培養72h生長情況如下表。


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