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閱讀:165發布時間:2019-04-19
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怎么調整培養基PH測定
所存微生物都受到其生存環境中pH的影響通常,選擇性物質的存在會縮小它們 生長的pH范圍。有時,培養基的酸度或堿度也能作為一種生長選擇因子。而對于生化 測試培養基,微生物在基質中顯tk活性的pH的范圍比生長所耑的PH范圍窄:因此,將 培養基的PH調至預期的范圍內是很蓽要的。當實驗室根據培養基成分自己配制培養基 時,必須檢測并調整pH必須指出的是,即使是提供的現成的合成脫水培養基 (尤其是對一些庫存的脫水培養基),在制成實驗用培養基后也需要對其*終PH進行測定。
測定培養基pH的*準確的方法是使用pH計。使用前必須用已知pH的(通常PH 為4~7)標準緩沖溶液進行校準。將pH計的電極用蒸餾水沖洗后浸入到燒杯的培養基 中,就可以從pH汁的刻度讀出培養基的pH。每個對每種不同pH計都提供有 詳細的操作說明。
配制培養基時,使用帶機械攪拌的pH計可以很容易地調整pH
培養基應在能夠不停攪拌的荇器(如大燒杯)中配制,使用磁力攪拌器,磁力攪拌器帶有聚乙烯或聚四氟乙烯包裝的磁棒。含瓊脂的培養基需在融化后調整其pH,用可加 熱的磁力攪拃器很容易辦到。調節pH時用巳知pH的標準緩沖液溶液先對pH計迸行 校準。然后將復合電極和電阻溫度計(如果有)置于培養基中,從燒杯遠離電極的一端緩 慢加入適量的鹽酸和氫氧化鈉,直到培養基達到并保持所需的pH。
PH計的溫度補償應考慮到溫度對電極系統的影響:在一些稀釋液和培養基中,PH 隨溫度的變化而有相當大的變化。對于液體培養基和稀釋液而言,pH通常既可以在25℃下,也可以在其使用時的溫度下調整和測定。
瓊脂培養基必須在溶解后進行PH的調整,溶解的溫度在45℃以上:因此,固體培養 基應在其使用溫度確定pH這時應使用平頭的復合電極,同吋用手動校準PII計的溫度 補償。在制備培養基時,若測定出培養基在熔化狀態和凝固狀態的pH有所不同時,說明 在調整pH時產生誤差。
同樣,制備的培養基在加熱滅菌處理(如高壓滅菌)時,也可能會產生PH的變化。對 于脫水培養某,己考慮到這一點,通常不需要再調整其pH。但應認真核對待用 培養基的pH如果脫水的瓊脂培養基在再次溶解或制備的過程中必須調整pH,那么在滅菌操作步驟之后用過濾滅菌的鹽酸和氫氧化鈉溶液進行調整,以避免造成因再次 滅菌而形成的培養基的過度加熱。當用不同的原料或藥品制備培養基時,必須在高壓滅 菌后檢測培養基的pH。此外,如果發現培養基的pH在每次高壓滅菌后都發生相同變 化,可在配制培養基時對pH進行適當調整。但仍需測定培養基滅菌后的zui終pH。
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