購(gòu)買客戶請(qǐng)先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購(gòu)的NovaBlue(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50圖片、種屬、貨號(hào)、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說(shuō)明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。
NovaBlue(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50圖片操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營(yíng)養(yǎng)豐富,可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃,225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時(shí),30℃培養(yǎng)可降低錯(cuò)誤重組的概率,若轉(zhuǎn)化control pUC19計(jì)算轉(zhuǎn)化效率,則需37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。
6. 將平板倒置放于37℃或30℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。
?
NovaBlue(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50圖片細(xì)胞的種類:
*種:
是凍存產(chǎn)品,由液氮直接拿出,干冰運(yùn)輸給客戶。一般不*這種,也較少使用這種方式,因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒(méi)操作好;另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式,快遞時(shí)間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過(guò)后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大,只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),*進(jìn)口來(lái)源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3
大鼠肝癌細(xì)胞;RH-35
KYNU Others Mouse 小鼠 KYNU / Kynureninase 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
SPC-A-1細(xì)胞,肺腺癌細(xì)胞 人口腔癌細(xì)胞,HB細(xì)胞 tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-1D3
人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHBMEC NA
PVRL2 Others Mouse 小鼠 CD112 / PVRL2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞cDNAHRCEpiC cDNA
PLK1 Others Mouse 小鼠 PLK1 / PLK-1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-1F3
SGC-7901細(xì)胞,胃腺癌細(xì)胞 人食管癌細(xì)胞,Eca-109細(xì)胞 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12]
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A5
VCAM1 Others Mouse 小鼠 VCAM1 / CD106 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3
大鼠肝癌細(xì)胞;RH-35
KYNU Others Mouse 小鼠 KYNU / Kynureninase 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
SPC-A-1細(xì)胞,肺腺癌細(xì)胞 人口腔癌細(xì)胞,HB細(xì)胞 tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-1D3
人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHBMEC NA
PVRL2 Others Mouse 小鼠 CD112 / PVRL2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
M17瓊脂shēng huà shì jì容量:2~8℃5毫升
TMB,2HCI 250mg/1g/100ml Amresco分裝
生鐵25克
4-基-1,3-二氧務(wù)烷 4-MqTHYL-1,3-DIOXOLcNq 107-47-2
1.2ml凍存管500u2~8℃
奈酚AS-BI嶙酸鹽,英文名或英文縮寫:Naphthol AS-BI phosphate,級(jí)別:AR,99.5%,規(guī)格:25克
646-19-51,7-二基庚烷;1,7-庚;七亞甲基1,7-DiaMinoheptane;HeptametxylenediaMine
2-Decanone甲基辛基酮100克CP,98%
2-氧基本全;鄰氧基本全;鄰茴香全;水楊全迷 2-Mqthoxybqnzcldqhydq;o-cniscldqhydq;Scli-cylcldqhydq Mqthyl qtqr 132-0-4
1,10-pxenanthrolinehydrate1,10-羅啉10克BR,90%
NovaBlue(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50圖片派洛寧Bshēng huà shì jì容量:100克
593-85-1碳酸胍;碳酸亞脲;胍碳酸鹽Guanidine te
兔肌動(dòng)蛋白shēng huà shì jì容量:RT25克
4-基 4-Amino,99% 13035-19-3 5G 通用試劑
硅膠HF254/薄層層析硅膠HF254/Silica gel HF254 TLC 250克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
NovaBlue(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50圖片注意事項(xiàng):
1. 感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。