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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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更新時(shí)間：2018-11-20 08:27:36瀏覽次數(shù)：476次
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收集F-BL21（DE3） 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10規(guī)格，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
F-BL21(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10規(guī)格細(xì)胞的種類：
*種：
是凍存產(chǎn)品，由液氮直接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不*這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，*進(jìn)口來源，*保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
F-BL21(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10規(guī)格操作方法:
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營(yíng)養(yǎng)豐富，可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃，225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時(shí)，30℃培養(yǎng)可降低錯(cuò)誤重組的概率，若轉(zhuǎn)化control pUC19計(jì)算轉(zhuǎn)化效率，則需37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘）
5. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。
6. 將平板倒置放于37℃或30℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
?
F-BL21(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10規(guī)格注意事項(xiàng):
1. 感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過長(zhǎng)，長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。
? 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A4
雜交瘤(B類);C3110D2B2
EED Others Human 人 EED / Embryonic Ectoderm Developme 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
BT549細(xì)胞，管癌細(xì)胞 人喉癌細(xì)胞,M4e細(xì)胞 大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1)
人前列腺平滑肌細(xì)胞cDNAHPSMC cDNA
NCR3 Others Human 人 NKp30 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人腎近曲小管上皮細(xì)胞RNAHRPTEpiC miRNA5 μg
LTF Others Human 人 LTF / Lactoferrin / Lactoansferrin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
Panc10.05 胰腺腺癌
CL-0450SW 982(人滑膜肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人腦血管平滑肌細(xì)胞
*;HEL 人小腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A4
雜交瘤(B類);C3110D2B2
EED Others Human 人 EED / Embryonic Ectoderm Developme 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
BT549細(xì)胞，管癌細(xì)胞 人喉癌細(xì)胞,M4e細(xì)胞 大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1)
人前列腺平滑肌細(xì)胞cDNAHPSMC cDNA
NCR3 Others Human 人 NKp30 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
6-APA6-基青霉烷酸5KU組織培養(yǎng)級(jí)，5mg/ml
3810-74-0*StreptoMycin Sulfate
Cornstarch玉蜀黍淀粉10克AR，99%
重鉻酸鉀 Potassium dichromate (ACS,≥99.0%) 7778-50-9 50G 通用試劑
1-基-3,3-二乙氧... 1-Amino-3,3-diethoxypropane,≥97% 41365-75-7 5G 通用試劑
鈉一水物1克
85252-22-8固紅RC鹽Fast red RC salt;DiazoniuM salt of 4-chloro-2-aMinoanisole;Diazotized 4-chloro-o-anisidine;2-AMino-4-chloroanisole diazotated zinc double salt;Diazo red RC;Azoic diazo 0;C.I. 37120
SERAFREEDMEMCRYOPRESERVATIONMEDIA無血清細(xì)胞凍存培養(yǎng)基(DMEM)組織培養(yǎng)級(jí)50 mlCOLD
3-溴-5-甲氧基 3-Bromo-5-methoxypyridine,97% 50720-12-2 1G 通用試劑
癸二酸二丁酯/皮脂酸二丁酯/癸二酸二正丁酯/DBS CP，98% 500毫升 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
F-BL21(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10規(guī)格偶氮脒類引發(fā)劑V60shēng huà shì jì容量：2～8℃1克
6674-22-21,8-二氮雜雙環(huán)[5，4，0]十一碳-7-烯1,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-ene
二錄氧化鋯，英文名或英文縮寫：Zirconyl chloride octahydrate，級(jí)別：3N，0.1×50㎜，規(guī)格：100克
鋨酸銨 Ammonium hexachloroosmate(IV) 12125-08-5 500MG 通用試劑
無水 Pyridine,anhydrous (99.8%) 50ML 通用試劑
購(gòu)買客戶請(qǐng)先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購(gòu)的F-BL21(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10規(guī)格、種屬、貨號(hào)、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。
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