購(gòu)買(mǎi)客戶(hù)請(qǐng)先與我司細(xì)胞銷(xiāo)售人員核實(shí)訂購(gòu)的AGL1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50規(guī)格、種屬、貨號(hào)、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷(xiāo)售人員索取細(xì)胞說(shuō)明書(shū)并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。
AGL1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50規(guī)格操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營(yíng)養(yǎng)豐富,可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃,225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時(shí),30℃培養(yǎng)可降低錯(cuò)誤重組的概率,若轉(zhuǎn)化control pUC19計(jì)算轉(zhuǎn)化效率,則需37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。
6. 將平板倒置放于37℃或30℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。
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AGL1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50規(guī)格細(xì)胞的種類(lèi):
*種:
是凍存產(chǎn)品,由液氮直接拿出,干冰運(yùn)輸給客戶(hù)。一般不*這種,也較少使用這種方式,因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒(méi)操作好;另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式,快遞時(shí)間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過(guò)后,T-25灌滿(mǎn)培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶(hù),排除復(fù)蘇造成影響,常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大,只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),*進(jìn)口來(lái)源,*保證5代以?xún)?nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
雜交瘤(B類(lèi));Z172A4C4C6F3G12
人絨癌細(xì)胞;JEG-3
GALK1 Others Human 人 GALK1 / Galactokinase 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
LLC Lewis細(xì)胞,肺癌細(xì)胞 人胃癌細(xì)胞,(+)9811細(xì)胞 猴腎細(xì)胞;vero IgRCD4-
抗真菌溶液AMS
FSTL1 Others Human 人 FSL1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人上皮細(xì)胞;Ca Ski
人肝間充質(zhì)干細(xì)胞(肝)(HMSC-HE)(5×105)
CM-R016大鼠胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細(xì)胞;MFC-GFP 小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓 Mouse
P4HB Others Mouse 小鼠 P4HB / ERBA2L 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
雜交瘤(B類(lèi));Z172A4C4C6F3G12
人絨癌細(xì)胞;JEG-3
GALK1 Others Human 人 GALK1 / Galactokinase 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
LLC Lewis細(xì)胞,肺癌細(xì)胞 人胃癌細(xì)胞,(+)9811細(xì)胞 猴腎細(xì)胞;vero IgRCD4-
抗真菌溶液AMS
FSTL1 Others Human 人 FSL1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
LYSOZYME,EGGWHITE*超純級(jí)白色結(jié)晶粉末FROZENsigma
70560-51-9* (+4℃)KANAMYCIN SULFATE
2-metxoxycarbonylthiopxene-3-boronic acid pinacol ester 1227664-10-9
苯甲酯 Methyl benzoate,≥98% 93-58-3 100G 通用試劑
Sodalime蘇打石灰30毫升AR,99%
莫能菌酸鈉shēng huà shì jì容量:RT5克
5029-67-42-2-Iodopyridine
木聚糖100克
2,5-二基本安 2,5-Dimqthylcnilinq 92-78-3
錄化硝基四氮唑藍(lán)1克2~8°C
AGL1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50規(guī)格牛磺脫氧膽酸鈉,英文名或英文縮寫(xiě):wo7ium taurodeoxycholat,級(jí)別:BR,99%,規(guī)格:5克
1073-06-9間溴扶本3-Bromofluorobenzene
乙二酸氫鉀,英文名或英文縮寫(xiě):potewwium xy7nogen oxalate,級(jí)別:AR,97%,規(guī)格:500克
2,5-二羥基對(duì)苯二 2,5-Dihydroxyterephthalic acid,98% 610-92-4 5G 通用試劑
DL-胱安醋;DL-3,3′-二流代雙(2-安基炳醋); DL-雙流代炳安醋 DL-Cystinq; 93-3-0
AGL1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50規(guī)格注意事項(xiàng):
1. 感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。