購買客戶請先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購的Ar A4 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50說明書、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。
Ar A4 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50說明書操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富,可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃,225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時(shí),30℃培養(yǎng)可降低錯(cuò)誤重組的概率,若轉(zhuǎn)化control pUC19計(jì)算轉(zhuǎn)化效率,則需37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。
6. 將平板倒置放于37℃或30℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
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Ar A4 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50說明書細(xì)胞的種類:
*種:
是凍存產(chǎn)品,由液氮直接拿出,干冰運(yùn)輸給客戶。一般不*這種,也較少使用這種方式,因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲存的zui好方式,快遞時(shí)間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大,只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,*進(jìn)口來源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞;INS-1
人胚胎肺成纖維細(xì)胞;WI-38
AGO2 Others Mouse 小鼠 AGO2 / Argonaute 2 / EIF2C2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
PIEC細(xì)胞,豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 人結(jié)腸癌細(xì)胞,T84細(xì)胞 CM-H061人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
心肌細(xì)胞培養(yǎng)基CMM
RK1 Others Human 人 kA / RK1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人前脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟裂解物HPA-v L
CHEK2 Others Mouse 小鼠 CHK2 / CHEK2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠子細(xì)胞;U14-GFP
JAR細(xì)胞,胎盤絨毛癌細(xì)胞 人食管鱗癌,KYSE30細(xì)胞 中國倉鼠卵巢細(xì)胞系;pDSr a2-mpl-X
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D3
TGFB1 Others Human 人 late TGFβ1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞;INS-1
人胚胎肺成纖維細(xì)胞;WI-38
AGO2 Others Mouse 小鼠 AGO2 / Argonaute 2 / EIF2C2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
PIEC細(xì)胞,豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 人結(jié)腸癌細(xì)胞,T84細(xì)胞 CM-H061人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
心肌細(xì)胞培養(yǎng)基CMM
RK1 Others Human 人 kA / RK1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
H-Val-OMeoHClL-纈酸甲酯鹽酸鹽10克特純,98.5%
628-13-7鹽酸鹽;鹽酸Pyridine xy7nochloride
PABAwo7iumsalt4-基本酸鈉500克BR,160-180萬U/g
草酸鈉 Sodium oxalate,≥99% 62-76-0 100G 通用試劑
溴代異戊烷 Isoamyl bromide,96% 107-82-4 100G 通用試劑
免疫血清兔抗豚鼠IgG1000只/袋RT
1551-27-52-正丙基噻吩 97%2-N-PROPYLTHIOpxenE
月桂基鹽胰蛋白胨肉湯100克
1-丁基-3-甲基咪唑... 1-Butyl-3-methylimidazolium hydrogen s... 262297-13-2 100G 通用試劑
白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ Atractylenolide I (≥98%,HPLC) 73069-13-3 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品
Ar A4 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50說明書鎳片10克RT
芴甲氧羰基-N-三本甲基-L-半胱酸NA
十四烷1克
對溴 p-Bromo,98% 106-38-7 25G 通用試劑
紅色氧化鉛/四氧化三鉛/鉛丹/氧化鉛/紅丹/Lead oxide red AR,95% 500克 國產(chǎn)
Ar A4 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50說明書注意事項(xiàng):
1. 感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過長,長時(shí)間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。