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人胚肺成纖維細(xì)胞；MRC-5操作步驟

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更新時間：2017-07-24 15:08:38瀏覽次數(shù)：243次

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人源免疫細(xì)胞及干細(xì)胞

細(xì)胞系

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轉(zhuǎn)化細(xì)胞

人正常組織來源細(xì)胞

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上海邦景實業(yè)有限公司

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產(chǎn)品簡介

人胚肺成纖維細(xì)胞；MRC-5操作步驟售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r，應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員，我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱 人胚肺成纖維細(xì)胞；MRC-5操作步驟
形態(tài)特性   成纖維細(xì)胞樣　
生長特性貼壁生長　
特征特性   MRC-5細(xì)胞系來自14周齡男性胎兒的正常肺組織，該細(xì)胞老化前能傳代42到46次群體倍增。它是正常二倍體細(xì)胞系，46，XY核型。模式染色體數(shù)為46，概率為70%。此細(xì)胞系為2003年6月引進(jìn)
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法   消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P（16+5）
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS　
支原體檢測陰性　
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類

細(xì)胞名稱	人胚肺成纖維細(xì)胞；MRC-5操作步驟
生長特性	貼壁生長
價格	來電可享受優(yōu)惠

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過五天時限至一個月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價，超過一個月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實驗體系，優(yōu)秀的科研隊伍，*的實驗設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
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星形肌動蛋白2(ASTN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
星形肌動蛋白1(ASTN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
天冬酰胺酶(ASPG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
精氨基琥珀酸裂解酶(ASL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Artemin蛋白(ARTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
苯胺素(ANLN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
古梅斯蛋白1(AMZ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
氨甲基轉(zhuǎn)移酶(AMT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
釉原蛋白Y-連鎖(AMELY)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
釉原蛋白X-連鎖(AMELX)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
成釉細(xì)胞蛋白(AMBN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
尿囊酸酶(ALLC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
胍基丁胺脲水解酶(AGMAT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
芳犬尿氨酸甲酰胺酶(AFMID)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
親尾蛋白(AFTPH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
腺苷合酶(ADSS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
腎上腺髓質(zhì)素2(ADM2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
順烏頭酸酶2(ACO2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Abl交互子2(ABI2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Goat Anti-rabbit IgG/PE PE標(biāo)記的羊抗兔IgG
Goat Anti-rabbit IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的羊抗兔IgG
Goat Anti-rabbit IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的羊抗兔IgG
Goat Anti-rabbit IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的羊抗兔IgG
Goat Anti-rabbit IgG/APC APC標(biāo)記的羊抗兔IgG
Goat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗兔IgG
Goat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗兔IgG
Goat Anti-rabbit IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗兔IgG
Goat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗兔IgG
Goat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗兔IgG
Goat Anti-rabbit IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的羊抗兔IgG
Goat Anti-rabbit IgG/Bio *標(biāo)記的羊抗兔IgG
Goat Anti-rabbit IgG/AP 堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的羊抗兔IgG
Goat Anti-rabbit IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的羊抗兔IgG
Goat Anti-rabbit IgG/FITC FITC標(biāo)記的羊抗兔IgG
Goat Anti-rabbit IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的羊抗兔IgG
Goat Anti-Chicken IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的羊抗雞IgG
Goat Anti-Chicken IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的羊抗雞IgG
Goat Anti-Chicken IgG/FITC FITC標(biāo)記的羊抗雞IgG
Goat Anti-Chicken IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的羊抗雞IgG
Goat Anti-Chicken IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的羊抗雞IgG
Goat Anti-Chicken IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的羊抗雞IgG
Goat Anti-Chicken IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的羊抗雞IgG