【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人外周血淋巴細胞；CCRF-SD操作步驟
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 由武漢大學醫學院基礎部免疫教研究提交保藏。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C6
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權限 A類
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
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原肌球調節蛋白3(TMOD3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
原肌球調節蛋白2(TMOD2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
原肌球調節蛋白1(TMOD1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
遮蔽蛋白(OBSCN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
CopineⅦ蛋白(CPNE7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
CopineⅤ蛋白(CPNE5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
CopineⅣ蛋白(CPNE4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
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CopineⅡ蛋白(CPNE2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
CopineⅠ蛋白(CPNE1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
N-乙酰轉移酶8(NAT8)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
N-乙酰轉移酶10(NAT10)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
Battenin蛋白(BTS)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
肌氨酸脫氫酶(SARDH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
小腦肽4(CBLN4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
精脒/精胺N1-乙酰基轉移酶1(SAT1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
精脒/精胺N1-乙酰基轉移酶2(SAT2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
多胺氧化酶(PAOX)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
甘胺酸-N-甲基轉移酶(GNMT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
TNK1 非受體型*蛋白激酶Tnk1抗體
Phospho-TNK1 (Tyr277) 磷酸化非受體型*蛋白激酶Tnk1抗體
TM9SF1 跨膜蛋白超家族9-1抗體
TMEM166 跨膜蛋白166抗體
*mt 線粒體DNA拓普西異構酶Ⅰ抗體
TOP2 alpha DNA拓普西異構酶ⅡA抗體
TOPO II/TOPO II Alpha DNA拓普西異構酶Ⅱ抗體
phospho-TOPO II Alpha (Ser1106) 磷酸化DNA拓普西異構酶Ⅱ抗體
TPH/Trptophan Hydroxylase *羥化酶抗體
phospho-TPH(Ser260) 磷酸化*羥化酶抗體
phospho-TPH(Ser19) 磷酸化*羥化酶抗體
TPO 甲狀腺過氧化物酶抗體
TRA16 激素受體相關蛋白16抗體
TRA16 激素孤兒受體相關蛋白抗體
TRADD 腫瘤壞死因子受體1相關死亡域蛋白抗體
phospho-TRADD(Ser299) 磷酸化腫瘤壞死因子受體1相關死亡域蛋白抗體
phospho-TRADD(Ser269) 磷酸化腫瘤壞死因子受體1相關死亡域蛋白抗體
phospho-TRADD(Ser274) 磷酸化腫瘤壞死因子受體1相關死亡域蛋白抗體
TRAF1 腫瘤壞死因子受體相關因子1抗體
TNFR2/TRAF2/CD120b 腫瘤壞死因子受體相關因子2抗體
TRAF3/CD40bp 腫瘤壞死因子受體相關蛋白3抗體
TRAF4/CART 1 腫瘤壞死因子受體相關蛋白4抗體
TRAF6 腫瘤壞死因子受體相關因子6抗體
TRAIL 腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體抗體
Transthyretin 轉甲狀腺素蛋白抗體
