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人胚胎皮膚成纖維細(xì)胞；HES操作步驟

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人胚胎皮膚成纖維細(xì)胞；HES操作步驟售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí)，應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員，我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱 人胚胎皮膚成纖維細(xì)胞；HES操作步驟
形態(tài)特性   成纖維細(xì)胞樣　
生長(zhǎng)特性貼壁生長(zhǎng)
特征特性   該細(xì)胞系來源于一男性胚胎的皮膚組織。2005年由*昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  15%NBS
傳代方法   1：2傳代；3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS　
支原體檢測(cè) 熒光法（-）　
STR   -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類

細(xì)胞名稱	人胚胎皮膚成纖維細(xì)胞；HES操作步驟
生長(zhǎng)特性	貼壁生長(zhǎng)
價(jià)格	來電可享受優(yōu)惠

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢(shì)：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià)，超過一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，優(yōu)秀的科研隊(duì)伍，*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
附試驗(yàn)法)
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白10(GLUT10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白11(GLUT11)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白7(GLUT7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白14(GLUT14)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5(GLUT5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6(GLUT6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白9(GLUT9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8(GLUT8)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
鈉鉀氯協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(NKCC1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
陰離子/糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(AST)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
鈉/葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(SGLT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
鈉/葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(SGLT2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
X-轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(Xtrp3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
*轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(GLYT2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
牛磺酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(TAUT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
X-轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(Xtrp2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
*轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLYT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
*轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(FOLT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(URAT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
白磷酸酶2Cα抗體
PP1C gamma 蛋白磷酸酶γ1抗體
PP2A alpha/beta 蛋白質(zhì)磷酸酶-2A抗體
PP2CA/PPM1A 蛋白磷酸酶2C亞型α抗體
phospho-PPM1A(Ser375) 磷酸化蛋白磷酸酶2C亞型α抗體
PP2Ac/PP4C 磷酸酯酶-2Ac抗體
PPAR-delta/beta D型-過氧化酶活化增生受體抗體
PPAR alpha α型-過氧化酶活化增生受體抗體
phospho-PPAR alpha(Ser12) 磷酸化α型-過氧化酶活化增生受體抗體
PPAR gamma 過氧化酶活化增生受體γ抗體
Phospho-PPAR Gamma (ser112) 磷酸化過氧化酶活化增生受體γ抗體
PPIA/Cyclophilin A 親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIA抗體
PPIB/Cyclophilin B 親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIB抗體
PPIG 親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIG抗體
Phospho-PPIG (Ser376) 磷酸化親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIG抗體
PPIL1 親環(huán)素相關(guān)蛋白1抗體
AKT/PKB 蛋白激酶B
phospho-AKT/PKB(Ser473) 磷酸化蛋白激酶B抗體
phospho-Akt(Thr308) 磷酸化蛋白激酶B抗體
phospho-AKT1/AKT2(Thr308+Thr309) 磷酸化蛋白激酶B抗體
phospho-AKT1(Ser129) 磷酸化蛋白激酶B抗體
phospho-Akt(Thr450) 磷酸化蛋白激酶B抗體
Phospho-HDAC4(Ser246)/HDAC5(Ser259)/HDAC7(Ser155) 磷酸化組蛋白去乙酰化酶4/5/7抗體
Phospho-HDAC4(Ser632)/HDAC5(Ser498)/HDAC7(Ser486) 磷酸化組蛋白去乙酰化酶