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SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T操作步驟

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所  在  地上海市

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更新時(shí)間:2017-07-24 16:36:09瀏覽次數(shù):251次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T操作步驟售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

細(xì)胞名稱  SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T操作步驟
形態(tài)特性   上皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性  貼壁生長(zhǎng)
特征特性   293細(xì)胞株插入SV40 T-抗原的溫度敏感基因后產(chǎn)生的高轉(zhuǎn)染效率的衍生株稱為293T。 
培養(yǎng)條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法   消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況  PN5
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS 
支原體檢測(cè)  陰性 
STR   Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12,14;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D19S433:18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11;D8S1179:12,14;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  A類

細(xì)胞名稱SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T操作步驟
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
價(jià)格來電可享受優(yōu)惠

冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
操作步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢(shì):
1、細(xì)胞株種類齊全,包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*,專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細(xì)胞株,免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片,三天回傳細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)圖片,五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā),超過五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià),超過一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系,優(yōu)秀的科研隊(duì)伍,*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
Vav1癌基因(VAV1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
輔肌動(dòng)蛋白α4(ACTN4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
Atrophin 1蛋白(ATN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
類固醇生成因子1(SF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
皮層肌動(dòng)蛋白(CTTN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
斑聯(lián)蛋白(ZYX)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
輔肌動(dòng)蛋白α1(ACTN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
脫氧核糖核酸酶Ⅱ(DNASEⅡ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
Pirin蛋白(PIR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
輸出蛋白1(XPO1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
融合蛋白(FUS)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
7-脫氫*還原酶(DHCR7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
氨基酰化酶1(ACY1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
內(nèi)收蛋白1(ADD1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
腺苷激酶(ADK)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
腺苷酸激酶2(AK2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
無羊膜蛋白(AMN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
血管抑素結(jié)合蛋白(AMOT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
Attractin蛋白(ATRN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
失調(diào)蛋白2(ATXN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 
 MTF-1  金屬應(yīng)答元件結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子-1抗體 
 MTHFR  亞甲基四氫*還原酶MTHFR抗體 
 MTNR1A/MTR-1A/MEL-1A-R  褪黑素受體1A/松果體素受體1A抗體 
 MTNR1B  褪黑素受體1B抗體 
 MLN/Motilin  胃動(dòng)素抗體 
 mTOR/FRAP  雷帕霉素靶蛋白抗體 
 Phospho-FRAP1/mTOR(Ser2448)  磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體 
 Phospho-mTOR (Ser2481)  磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體 
 Phospho-mTOR (Tyr144)  磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體 
 Phospho-RhoA(Ser188)  磷酸化RhoA蛋白抗體 
 Phospho-mTOR (Thr2446)   磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體 
 MTLR  胃動(dòng)素受體抗體 
 MTTP  微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 
 MVD  甲羥戊酸脫羧酶抗體 
 CA15-3/Muc1  粘蛋白-1/上皮膜抗原抗體 
 Muc2  粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗體 
 mucin3/Muc3  粘蛋白-3抗體 
 mucin 5B/Muc5B  粘蛋白-5B抗體 
 Mucin 4/Muc4  粘蛋白-4抗體 
 MVK  甲羥戊酸激酶抗體 
 STXBP1/Munc18  神經(jīng)突觸前膜胞內(nèi)蛋白18抗體 
 phospho-STXBP1(Ser515)  磷酸化神經(jīng)突觸前膜胞內(nèi)蛋白抗體 
 MuRF1/Trim63  肌肉細(xì)胞特異性泛素蛋白連接酶1抗體 
 MyD88  髓樣分化蛋白抗體 
 MYL9  肌球蛋白輕鏈9抗體 
 phospho-MYL9(Thr19)  磷酸化肌球蛋白輕鏈9抗體 
 NIPP1/ARD1  核抑制蛋白磷酸酶1抗體 
 Myelin Protein Zero  外周髓磷脂P0蛋白/P0蛋白抗體


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