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人胚腎細胞(SV40T基因修飾);293T/17操作步驟

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更新時間:2017-07-24 16:40:18瀏覽次數:196次

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產品簡介

人胚腎細胞(SV40T基因修飾);293T/17操作步驟售后:收到細胞后7天,如發現細胞有質量問題(如污染,死亡,快遞運輸等原因)時,應出具書面質量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

詳細介紹

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

細胞名稱  人胚腎細胞(SV40T基因修飾);293T/17操作步驟
形態特性   上皮細胞
生長特性  貼壁生長
特征特性   293細胞株插入SV40 T-抗原的溫度敏感基因后產生的高轉染效率的衍生株稱為293T。 
培養條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  優質胎牛血清,10%
傳代方法   消化5-15分鐘。1:4-1:8。3天內可長滿。
傳代情況  P(17+5)
凍存條件   基礎培養基+8%DMSO+20%FBS 
支原體檢測  陰性 
STR  
同工酶  
染色體  
使用權限  A類

細胞名稱人胚腎細胞(SV40T基因修飾);293T/17操作步驟
生長特性 貼壁生長
價格來電可享受優惠

冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
操作步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢:
1、細胞株種類齊全,包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等
2、*,專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株,免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片,三天回傳細胞生長狀態圖片,五天內有問題公司負責重發,超過五天時限至一個月內重發細胞收半價,超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠,完善、穩定的實驗體系,優秀的科研隊伍,*的實驗設備、準確可靠的實驗結果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
組織蛋白酶A(CTSA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
蛛毒素受體2(LPHN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
*受體1(SSTR1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
突觸素(SYP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
滋養層特異性糖蛋白(TPBG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
橋粒芯糖蛋白3(DSG3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
血小板親和蛋白2(PKP2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
鹽皮質激素受體(MR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
角蛋白6B(KRT6B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
角蛋白5(KRT5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
角蛋白3(KRT3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
蝸管蛋白(COIL)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
角蛋白15(KRT15)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
角蛋白12(KRT12)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
角蛋白7(KRT7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
ADP核糖轉移酶4(ART4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
拓撲異構酶Ⅱ(TOP2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
谷氨氨肽酶(GluAP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
前-B-淋巴細胞基因1(VPREB1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
巖藻糖基轉移酶3(FUT3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)  
強因子2抗體 
 Phospho-MEF2A (Ser408)  磷酸化肌細胞增強因子2抗體 
 MEF2C  肌細胞增強因子2C抗體 
 phospho-MEF2C(Ser59)  磷酸化肌細胞增強因子2C抗體 
 phospho-MEF2C(Ser396)  磷酸化肌細胞增強因子2C抗體 
 Phospho-MEF2A(Thr319)  磷酸化肌細胞增強因子2抗體 
 phospho-MEF2C(Ser387)  磷酸化肌細胞增強因子2C抗體 
 phospho-MEF2C(Thr20)  磷酸化肌細胞增強因子2C抗體 
 phospho-MEF2C(Thr300)  磷酸化肌細胞增強因子2C抗體 
 Megsin  *蛋白酶抑制劑B7抗體 
 MEF2D  肌細胞特異性增強因子2D抗體 
 phospho-MEF2D(Ser180)  磷酸化肌細胞特異性增強因子2D抗體 
 phospho-MEF2D(Ser444)  磷酸化肌細胞特異性增強因子2D抗體 
 Melamine  三聚氰胺抗體 
 Melamine  三聚氰胺抗體 
 Melanoma HMB45/Melanoma/Melan-A/MART-1  黑色素瘤相關抗原/黑色素-A抗體 
 Met Enkephalin  *腦啡肽抗體 
 MEK1/MAPKK1/MEKK1  MEK1/MAPKK1抗體(N-端) 
 Menin/Men1  Menin抑癌蛋白抗體 
 phospho-alpha Adducin(Ser726)  磷酸化內收蛋白a1抗體 
 Metal ion transporter  擬南介金屬離子轉運蛋白抗體 
 Mfn1  線粒體融合蛋白1抗體 
 MGMT  O6甲基*DNA甲基轉移酶抗體 
 Metallothionein  金屬硫蛋白抗體 
 Metallothionein 3  金屬硫蛋白3抗體 
 


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