【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
1.產品名稱：人肺大動脈內皮細胞操作步驟
2.組織來源：肺動脈組織
3.產品規格：5×10^5cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介：
人肺大動脈內皮細胞分離自肺大動脈組織；肺大動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中，把靜脈血由心臟導向肺臟的動脈。肺大動脈起于右心室，在主動脈之前向左上后方斜行，在主動脈弓下方分為左、右肺動脈，經肺門入肺。肺動脈干位于心包內，為一粗短的動脈干。起自右心室，在升主動脈前方向左后上方斜行，至主動脈弓下方分為左、右肺動脈。左肺動脈較短，在左主支氣管前方橫行，分二支進入左肺上、下葉。右肺動脈較長而粗，經升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行，至右肺門處分為三支進入右肺上、中、下葉。細胞呈單層多角形鋪路石狀分布；該細胞在維持血管內外的動態平衡、合成和分泌細胞因子和介質、維持凝血和纖溶的動態平衡中起重要作用。肺大動脈內皮細胞呈單層多角形鋪路石狀分布，該細胞在維持血管內外的動態平衡、合成和分泌細胞因子和介質、維持凝血和纖溶的動態平衡中起重要作用。
本公司的肺大動脈內皮細胞采用*-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經CD31/vWF免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養基信息：
M199、FBS、內皮細胞生長添加劑、Heparin、Ascorbic Acid、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態圖片，五天內有問題公司負責重發，超過五天時限至一個月內重發細胞收半價，超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠，完善、穩定的實驗體系，優秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
白介素9(IL9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
白介素19(IL19)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
補體受體2(CR2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
環腺苷二磷酸核糖水解酶(cADPRH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
突觸核蛋白γ(γSYN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
腎足蛋白(NPHN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
Podocin蛋白(PDCN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
肌紅蛋白(MYO)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
干擾素β(IFNβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
干擾素β(IFNβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
足盂蛋白(PCX)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
前列腺抑制肽(PIP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
肝素酶(HPA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
*蛋白酶1(PRSS1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
血管內皮細胞蛋白C受體(PROCR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
蛋白C(PROC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
*豐富蛋白(GRP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
蛋白Z(PROZ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
甘丙肽(GAL)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
激活蛋白C(APC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
CKR-L2( G protein-coupled receptor-2 ) G蛋白偶聯受體-2(抗原) Acetyl-Histone H4(K16) 乙酰化組蛋白H4(K16)抗體 0.5mg
GSK-3 Beta, (Glycogen Synthase Kinase-3) 葡萄糖合成激酶-3（抗原） AFP 甲胎蛋白抗體 0.5mg
GTP-CH-1 三磷酸鳥苷環水解酶（抗原） AEV(Avian Encephalomyelitis virus) 禽腦脊髓炎病毒AEV抗體 0.5mg
H5N1-M2(Avian influenza Matrix Protein-2) H5N1流感病毒M2型（抗原） ADAM17/CD156b 腫瘤壞死因子α轉換酶 0.5mg
HCV-Core 丙型肝炎病毒-C區（多肽） PGT/Slco2a1 溶質載體蛋白家族21成員2抗體 1mg
HCV-NS1 丙型肝炎病毒-NS1（抗原） ADAM10/MADM/CD156c 去整合素樣金屬蛋白酶10抗體 0.5mg
HCV-NS3 丙型肝炎病毒-NS3（抗原） Salmonella 沙門氏菌抗體（多型） 0.5mg
HCV-NS4a 丙型肝炎病毒-NS4a（抗原） ADAM11 去整合素樣金屬蛋白酶11抗體 0.5mg
HEV 戊型肝炎病毒（抗原） Histone H3 (Tri Methyl K4) *基化組蛋白H3抗體 0.5mg
HGV(Hepatitis G vivus) 庚型肝炎病毒（抗原） MAGEA11 黑色素瘤相關抗原11抗體 0.5mg
HisX6 聚*標簽蛋白 ADAMTS12 整合素樣金屬蛋白酶與*1型-12抗體 0.5mg
HIV gp120 艾滋病病毒（抗原） ADH/AVP 抗利尿激素/血管升壓素抗體（和肽素） 0.5mg
HSP-60( Heat shock protein-60) 熱休克蛋白-60（抗原） GDF9 生長分化因子9抗體 0.5mg
HSP-70 peptide 熱休克蛋白-70（多肽抗原） ADAM8 去整合素樣金屬蛋白酶8抗體 0.5mg
alpha Adaptin/AP1 銜接蛋白α抗原 NT-3 神經營養因子3抗體 0.5mg
