【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
1.產品名稱：大鼠腎足突細胞操作步驟
2.組織來源：腎組織
3.產品規格：5×10^5cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介：
大鼠腎足突細胞分離自腎組織；腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢，被鮑氏囊所包裹，是尿液形成的重要構造。血液經由入球小動脈進入腎小球。腎小球內的微血管不像其他微血管，匯流入靜脈，而是流入出球小動脈。在腎小球內，微血管受到高壓，而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進行。微血管中的血液經由超濾作用之后，形成濾液，滲入鮑氏囊內。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體，腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。足細胞（podocyte）即腎小囊臟層上皮細胞，它附著于腎小球基底膜（GBM）的外側，連同GBM和毛細血管內皮一起構成了腎小球血液濾過屏障。足細胞特殊的解剖位置，使得其體內研究較為困難；又由于正常成年機體的腎臟足細胞是一種終末分化細胞，體外培養的原代細胞不能增殖。足細胞呈星型多突狀，胞體較大，由胞體伸出許多突起，又稱足突（FP），呈指狀交叉復蓋于GBM外表面，并通過黏附分子和蛋白多糖分子與GBM相連。足細胞在正常情況下可以分泌GBM的主要組成成分，IV型膠原和纖維連接蛋白（FN）；在促腎纖維化引資等刺激下還能分泌具有降解GBM作用的基質金屬蛋白酶（MMPs）和組織蛋白酶，從而在GBM的代謝平衡中發揮重要作用。足細胞之間鄰近的足突相互交替，形成了許多30-40nm的裂孔，孔上覆蓋一層厚4-6nm的裂孔隔膜，即腎小球足突間裂孔隔膜。后者是血漿蛋白通過脈管系統的zui后屏障，對于維持腎小球濾過屏障結構與功能完整性發揮關鍵作用。
本公司的大鼠腎足突細胞采用機械研磨過不同孔徑不銹鋼網篩結合膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經Nephrin、WT-1、Synaptopodin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養基信息：
M199、FBS、上皮細胞生長添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態圖片，五天內有問題公司負責重發，超過五天時限至一個月內重發細胞收半價，超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠，完善、穩定的實驗體系，優秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
Plaet Derived Growth Factor Subunit B (PDGFB) 96T Mus musculus (Mouse)
過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17263 CLIA Kit for Plaet Derived Growth Factor Subunit B (PDGFB) 96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17264 CLIA Kit for Plaet Derived Growth Factor Subunit B (PDGFB) 96T Rattus norvegicus (Rat)
*Ⅱ(F2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17265 CLIA Kit for Plaet Derived Growth Factor Receptor Like Protein (PDGFRL) 96T Homo sapiens (Human)
干擾素α(IFNα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17266 CLIA Kit for Plaet Derived Growth Factor Receptor Like Protein (PDGFRL) 96T Mus musculus (Mouse)
Apelin 12蛋白(AP12)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17267 CLIA Kit for Plaet Derived Growth Factor Receptor Like Protein (PDGFRL) 96T Rattus norvegicus (Rat)
Apelin 12蛋白(AP12)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17268 CLIA Kit for Growth Hormone 2 (GH2) 96T Homo sapiens (Human)
前列腺素E受體2(EP2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17269 CLIA Kit for Growth Hormone 2 (GH2) 96T Mus musculus (Mouse)
前列腺素E受體2(EP2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17270 CLIA Kit for Growth Hormone 2 (GH2) 96T Rattus norvegicus (Rat)
甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHrP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17271 CLIA Kit for Interleukin 1 Eta (IL1h) 96T Homo sapiens (Human)
甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHrP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17272 CLIA Kit for Interleukin 1 Eta (IL1h) 96T Mus musculus (Mouse)
甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHrP)檢測試劑盒(酶聯免疫
0.2ml
Anti-HSP-27 TrK A (h-NGFR) (p140- TrK A) 神經生長因子的一種（抗原） X57400 0.1ml
Anti-HSP-60 rh-VEGF(GST Tag)(Recombinant Vascuoar endothelial growth factor) 重組人血管內皮細胞生長因子 X57401 0.1ml
Anti-HSP-70 TrK A.B.C 神經生長因子的一種（抗原） X57402 0.1ml
Anti-HSP-90α active Caspase 3(caspase-3 p12 subunit) 活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗原 X57403 0.1ml
Anti-HSP-90β r-GST(Recombinant Glutathione S-T Ahents) 重組*轉移酶GST標簽蛋白 X57404 0.1ml
anti-HtrA2/Omi CASP4(Caspase-4) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗原 X57405 0.2ml
Anti-hTRT omerase catalytic subunit Trk B 神經生長因子受體的一種（抗原） X57406 0.1ml
Anti-Human serumAnti-Human serum GDF8/MSTN(growth differntiation factor 8) 重組生長分化因子8/肌肉抑制素 X57407 1ml
Anti-Hypothetical protein Trk B 神經生長因子受體的一種（抗原） X57408 0.2ml
anti-IAA Insulin protein (Active) *細胞因子 X57409 0.1ml
anti-IAP-5 Trk C 神經生長因子受體的一種（抗原） X57410 0.2ml
Anti-IASPP TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)(NT) 促甲狀腺素受體（抗原） X57411 0.1ml
Anti-ICAD Caspase Caspase-8 (pro Mch5) 半*蛋白酶8抗原 X57412 0.2ml
Anti-IDE TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)(CT) 促甲狀腺素受體（抗原） X57413 0.1ml
