【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

1.產(chǎn)品名稱：大鼠心肌細(xì)胞操作步驟

2.組織來源：心臟組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠心肌細(xì)胞分離自心臟組織；心臟是脊椎動(dòng)物身體中zui重要的一個(gè)器官，主要功能是為血液流動(dòng)提供壓力，把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分。心臟由心肌構(gòu)成，左心房、左心室、右心房、右心室四個(gè)腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動(dòng)血液流動(dòng)，向器官、組織提供充足的血流量，以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無機(jī)鹽、尿素和尿酸等），使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。心肌細(xì)胞呈菱形、多邊形等不規(guī)則形狀；細(xì)胞培養(yǎng)2h后開始貼壁，呈梭形；到12h左右，細(xì)胞開始伸出偽足，呈菱形、多角形；細(xì)胞分離培養(yǎng)48h以后，大部分伸出偽足、呈巴掌狀，部分心肌細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)搏動(dòng)；心肌細(xì)胞為終末分化細(xì)胞，在體外不增殖。體外培養(yǎng)的心肌細(xì)胞可保持結(jié)構(gòu)及功能上的某些特點(diǎn)，并具有自發(fā)性節(jié)律搏動(dòng)，且心肌細(xì)胞的培養(yǎng)具有簡(jiǎn)便、定量、重復(fù)性好以及不受神經(jīng)體液因素的影響等特點(diǎn)。利用培養(yǎng)的心肌細(xì)胞在探索非血液動(dòng)力學(xué)因素所致的心肌肥厚的調(diào)節(jié)，研究心肌細(xì)胞的生物力學(xué)、凋亡、受體下調(diào)、缺血預(yù)處理、信號(hào)通路、對(duì)作用于心臟的新藥進(jìn)行篩選并對(duì)其安全性進(jìn)行評(píng)價(jià)以及從培養(yǎng)的心肌細(xì)胞中提取有價(jià)值的生物因子等方面具有廣闊的應(yīng)用前景，對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

本公司的大鼠心肌細(xì)胞采用膠原酶-*聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法，并用化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶；細(xì)胞經(jīng)α-Sarcometric Actin、MF-20免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

5.培養(yǎng)基信息：

DMEM[H]、FBS、Penicillin、Streptomycin等

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢(shì)：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià)，超過一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，優(yōu)秀的科研隊(duì)伍，*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
超氧化物歧化酶1(SOD1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) M17222 CLIA Kit for Amphiregulin (AREG) 96T Chicken (Gallus)
丙二醛(MDA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) M17223 CLIA Kit for Amphiregulin (AREG) 96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
60kD熱休克蛋白(HSPD1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) M17224 CLIA Kit for Atonal Homolog 1 (ATOH1) 96T Homo sapiens (Human)
60kD熱休克蛋白(HSPD1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) M17225 CLIA Kit for Atonal Homolog 1 (ATOH1) 96T Mus musculus (Mouse)
60kD熱休克蛋白(HSPD1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) M17226 CLIA Kit for Atonal Homolog 1 (ATOH1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
血管緊張素原(AGT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) M17227 CLIA Kit for Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2) 96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
血管緊張素原(AGT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) M17228 CLIA Kit for Connective Tissue Growth Factor (CTGF) 96T Homo sapiens (Human)
血管緊張素原(AGT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) M17229 CLIA Kit for Connective Tissue Growth Factor (CTGF) 96T Mus musculus (Mouse)
脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(CETP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) M17230 CLIA Kit for Connective Tissue Growth Factor (CTGF) 96T Rattus norvegicus (Rat)
神經(jīng)型一氧化氮合酶()檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) M17231 CLIA Kit for Connective Tissue Growth Factor (CTGF) 96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
神經(jīng)型一氧化氮合酶()檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) M17232 CLIA Kit for Connective Tissue Growth Factor (CTGF) 96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
神經(jīng)型一氧化氮合酶()檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸
Anti-GITR    PI3K  磷脂酰肌醇激酶（抗原） X57336  0.1ml
Anti-Glasses Snake poison Protein   BMP4(bone morphogenetic protein 4)  骨形態(tài)發(fā)生蛋白4（抗原） X57337  0.2ml
Anti-GLI1   PLGF (Placenta growth factor)  小鼠胎盤生長(zhǎng)因子（多肽抗原） X57338  0.2ml
Anti-GLP-1   PLGF (Placenta growth factor)  胎盤生長(zhǎng)因子（多肽抗原） X57339  0.1ml
Anti-GLP-2   PLGF (Placenta growth factor fragment)(human)  人胎盤生長(zhǎng)因子（多肽抗原） X57340  0.2ml
Anti-GLUT1   PP-1  蛋白磷酸酯酶-1（抗原） X57341  0.1ml
Anti-GLUT2   BMPR-1A(Bone Morphogenetic protein Receptor-1A)  骨成型蛋白受體1A抗原 X57342  0.1ml
Anti-GLUT3   PPAR-delta (peroxisome proliferator-activated receptor)  D型-過氧化酶活化增生受體(多肽） X57343  0.2ml
Anti-GLUT4   PP-2A (protein phosphatase 2A)  蛋白質(zhì)磷酸酶-2A（抗原） X57344  0.1ml
Anti-Glycoprotein  [Rubella virus]   BOb-1(B-cell oct-binding protein 1)  B細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子抗原 X57345  0.2ml
Anti-GPA33   PP-2B alpha 1   蛋白磷酸酯酶-2B 催化亞單位（抗原） X57346  0.2ml
Anti-GPC3   PR (Progestogerone receptor)  孕激素受體（抗原） X57347  0.1ml
Anti-GR    PS-1(NT)，Presennillin-1(S182)  早老素蛋白-1（抗原） X57348  0.1ml
Anti-GRK1    PS-1，Presennillin-1(CT)  早老素蛋白-1（S182） X57349  0.2ml
Anti-GRK2    BRCA1(Breast cancer susceptbility gene 1)(mouse rat)  癌易感基因1抗原(小鼠 大鼠) X57350  0.2ml
Anti-GRM2    BRCA1  癌易感基因1抗原 X57351  0.2ml
Anti-GRM3    PSD-95   突觸后密度蛋白95（抗