【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
1.產品名稱：大鼠冠狀動脈內皮細胞操作步驟
2.組織來源：冠狀動脈組織
3.產品規格：5×10^5cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介：
大鼠冠狀動脈內皮細胞分離自冠狀動脈組織；冠狀動脈是供給心臟血液的動脈，起于主動脈根部，分左右兩支，行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則，將冠狀動脈的分布分為三型：右優勢型、均衡型、左優勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的*對分支。左冠狀動脈為一短干，發自左主動脈竇，經肺動脈起始部和左心耳之間，沿冠狀溝向左前方行后，立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行，旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。冠狀動脈內皮細胞呈單層扁平分布，是一薄層的專門上皮細胞，它形成冠狀動脈的內壁，是血管管腔內血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口。內皮細胞是沿著整個循環系統，由心臟直至zui小的微血管。
本公司的大鼠冠狀動脈內皮細胞采用混合酶短暫消化后組織貼塊、結合內皮細胞培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經CD31/vWF免疫熒光鑒定，純度可達80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養基信息：
M199、FBS、內皮細胞生長添加劑、Heparin、Ascorbic Acid、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態圖片，五天內有問題公司負責重發，超過五天時限至一個月內重發細胞收半價，超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠，完善、穩定的實驗體系，優秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
*Ⅹ(F10)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17131 CLIA Kit for Albumin (ALB) 96T Homo sapiens (Human)
*Ⅹ(F10)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17132 CLIA Kit for Albumin (ALB) 96T Mus musculus (Mouse)
*Ⅸ(F9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17133 CLIA Kit for Albumin (ALB) 96T Rattus norvegicus (Rat)
*Ⅸ(F9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17134 CLIA Kit for Galanin (GAL) 96T Homo sapiens (Human)
*Ⅸ(F9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17135 CLIA Kit for Galanin (GAL) 96T Mus musculus (Mouse)
含血管性血友病因子A域蛋白1(vWA1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17136 CLIA Kit for Galanin (GAL) 96T Rattus norvegicus (Rat)
含血管性血友病因子A域蛋白1(vWA1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17137 CLIA Kit for Low Density Lipoprotein (LDL) 96T Homo sapiens (Human)
含血管性血友病因子A域蛋白1(vWA1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17138 CLIA Kit for Antidiuretic Hormone (ADH) 96T Homo sapiens (Human)
脂蛋白a(Lpa)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17139 CLIA Kit for Antidiuretic Hormone (ADH) 96T Mus musculus (Mouse)
載脂蛋白A1(APOA1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17140 CLIA Kit for Lysozyme (LZM) 96T Chicken (Gallus)
α-胞襯蛋白(SPTAN1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) M17141 CLIA Kit for Hyaluronidase (HAase) 96T Homo sapiens (Human)
Anti-Cyclin B1 GIP (Gastric Inhibitory polypeptide) 胃泌素抑制肽（抗原） X57204 0.1ml
Anti-Cyclin C ANGPTL2/ANG-2 (Angiopoietin-like Protein 2) 血管位蛋白樣2/血管生成素樣蛋白-2（多肽） X57205 0.1ml
Anti-Cyclin D1 GLP-2(Glucagon-like peptide-2) 胰高血糖素樣肽-2（多肽抗原） X57206 0.1ml
Anti-Cyclin D2 GRP94 (gp96) 94kDa 糖調節蛋白（抗原） X57207 0.1ml
Anti-Cyclin E Annexin A 膜粘連蛋白 A抗原 X57208 0.1ml
Anti-Cyclin H G Protein(Guanine nucleotide-binding regulatory protein) G蛋白（鳥苷酸結合蛋白）（抗原） X57209 0.2ml
Anti-Cygb GR (Glucocorticoid receptor) 糖皮質激素受體 多肽 X57210 0.1ml
Anti-CYP450 Annexin II 膜粘連蛋白-2抗原 X57211 0.2ml
anti-Cyr61 GSK-3 Beta(NT) (Glycogen Synthase Kinase-3 Beta) 糖原合酶激酶-3β（抗原） X57212 0.2ml
anti-CYP19 CKR-L2( G protein-coupled receptor-2 ) G蛋白偶聯受體-2(抗原) X57213 0.2ml
Anti-Cytochrome C GSK-3 Beta, (Glycogen Synthase Kinase-3) 葡萄糖合成激酶-3（抗原） X57214 0.1ml
Anti-Cytokeratin GTP-CH-1 三磷酸鳥苷環水解酶（抗原） X57215 0.1ml
Anti-anti-HCMV PP65/HHV5 PP65 H5N1-M2(Avian influenza Matrix Protein-2) H5N1流感病毒M2型（抗原） X57216 0.1ml
anti-HCMV UL49 HCV-Core 丙型肝炎病毒-C區（多肽） X57217 0.2ml
anti-HCMV UL23/HHV5 UL23 HCV-NS1 丙型肝炎病毒-NS1（抗原） X57218 0.1ml
