1.產(chǎn)品名稱：大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方法

2.組織來源：皮膚組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞分離自皮膚組織；表皮位于動(dòng)物皮膚的外層，由胚胎時(shí)期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu)，由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞是一種能合成角質(zhì)蛋白的上皮細(xì)胞，此類細(xì)胞為表皮的主體，由表皮深層始逐漸增殖、分化，并在成為角化的角質(zhì)細(xì)胞中，細(xì)胞核與細(xì)胞器*消失，細(xì)胞亦失去生理功能而脫落。未脫落部分對機(jī)體尚有保護(hù)作用，故不必在洗擦身體時(shí)用力搓擦，使其過早脫失。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞主要分布于表皮基底層，在上皮程序性死亡后，細(xì)胞產(chǎn)生角化并移向表皮。體外培養(yǎng)的表皮角化細(xì)胞容易導(dǎo)致終末分化，不能充分增殖。角質(zhì)形成細(xì)胞zui終產(chǎn)生角質(zhì)蛋白，在其向角質(zhì)細(xì)胞演變過程中，一般可以分為四層，即基底層、棘層、顆粒層以及角質(zhì)層。有人把前三層或前二層稱為生發(fā)層或馬爾匹基層。此外，在某些部位，特別在掌跖部位，角質(zhì)層下方還可見到透明層。

本公司的大鼠表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞先*消化、后*-膠原酶混合消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶；細(xì)胞純度可達(dá)80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

5.培養(yǎng)基信息：

F12、bFGF、Insulin、Transferrin、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等

優(yōu)勢：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià)，超過一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，優(yōu)秀的科研隊(duì)伍，*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
一氧化氮合酶運(yùn)輸因子(NOSTRIN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) M17016 CLIA Kit for Progesterone (Pg) 96T General
一氧化氮合酶運(yùn)輸因子(NOSTRIN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) M17017 CLIA Kit for Estradiol (E2) 96T General
巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) M17018 CLIA Kit for Cortisol 96T General
趨化因子C-C-基元受體8(CCR8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) M17019 CLIA Kit for Troponin I Type 3, Cardiac (TNNI3) 96T Homo sapiens (Human)
免疫球蛋白G1(IgG1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) M17020 CLIA Kit for Myoglobin (MYO) 96T Homo sapiens (Human)
環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) M17021 CLIA Kit for Myoglobin (MYO) 96T Mus musculus (Mouse)
腫瘤蛋白p53(TP53)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) M17022 CLIA Kit for Myoglobin (MYO) 96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
腫瘤蛋白p53(TP53)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) M17023 CLIA Kit for Myoglobin (MYO) 96T Rattus norvegicus (Rat)
腫瘤蛋白p53(TP53)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) M17024 CLIA Kit for Endothelin 1 (EDN1) 96T Homo sapiens (Human)
P物質(zhì)(SP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) M17025 CLIA Kit for Endothelin 1 (EDN1) 96T Mus musculus (Mouse)
P物質(zhì)(SP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) M17026 CLIA Kit for Endothelin 1 (EDN1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
速激肽受體1(TACR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) M17027 CLIA Kit for N-Terminal Pro Brain Natriuretic Peptide (NT-ProBNP) 96T Homo sapiens (Human)
Anti-ATF1    Actin Alpha /Alpha-SMA (Actin alpha , smooth muscle aorta)  肌動(dòng)蛋白(抗原） X57023  0.1ml
Anti-ATF2    rHBsAg   重組乙肝病毒表面抗原 X57024  0.2ml
Anti-ATF3    AEBP1 (Adipocyte enhance binding protein 1)  脂肪細(xì)胞增強(qiáng)結(jié)合蛋白1 X57025  0.2ml
Anti-B7-H1/PDL1/CD274   Melamine/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記三聚氰胺 X57026  0.1ml
Anti-B7-H4    SP-B peptide  肺表面活性蛋白B抗原 X57027  0.2ml
Anti-BACE/ASP2    DCP peptide  異常*原/脫-γ-羧基*原抗原 X57028  0.1ml
Anti-Bad    MMP-9(matrix metalloproteinase 9)  基質(zhì)金屬蛋白酶-9(抗原) X57029  0.1ml
anti-Bak   AGER(Advanced glycosylation end product-specific receptor)  晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體(抗原） X57030  0.1ml
Anti-BADH2    14-3-3 protein  14-3-3 蛋白（多肽抗原） X57031  0.1ml
Anti-Bassoon/RCN  14-3-3 family protein(Malus domestica (Apple) (Malus sylvestris))  植物14-3-3蛋白抗原 X57032  0.2ml
Anti-Bax   FRA1/FOSL1 peptide   FRA-1多肽蛋白 X57033  0.1ml
Anti-Bcl-2   AIF　(Apoptosis-Inducing Factor)  調(diào)亡誘導(dǎo)因子(多肽片斷抗原） X57034  0.1ml
Anti-BCRP/ABCG2/BXP-21   Adenylate Kinase 1 (AK-1)  腺苷酸激酶-1 X57035  0.1ml
Anti-BDNF    Akt/PKB  蛋白激酶B（抗原） X57036  0.1ml
Anti-Beta-casein   2,4-D/KLH(2,4-Dichlorophenoxyacetic acid)  2，4-二氯苯氧乙酸偶聯(lián)血藍(lán)蛋白 X57037  0.2ml
anti-bov β-lactoglobulin   2,4-D/BSA  2，4-二氯苯氧乙酸偶聯(lián)牛血清白蛋白 X57038  1.0ml
anti-bov Casein   CA153/MUC1/KL-6 peptide  癌相關(guān)抗原 X57039  1.0ml