【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

1.產(chǎn)品名稱：大鼠腎臟巨噬細(xì)胞操作步驟

2.組織來源：腎組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

大鼠腎臟巨噬細(xì)胞分離自腎組織；腎臟是機(jī)體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、*等，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能，生成腎素、促紅細(xì)胞生成素、活性*3、前列腺素、激肽等，又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場(chǎng)所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進(jìn)行。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞，有多種功能，是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對(duì)象。巨噬細(xì)胞較易獲得，便于培養(yǎng)，并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以*生存。巨噬細(xì)胞（Macrophages）是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細(xì)胞，而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞，在脊椎動(dòng)物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)（先天性免疫）和特異性防衛(wèi)（細(xì)胞免疫）。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對(duì)細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用（即吞噬以及消化），并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞，令其對(duì)病原體作出反應(yīng)。

本公司的大鼠腎臟巨噬細(xì)胞采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶；細(xì)胞經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

5.培養(yǎng)基信息：

DMEM[H]、FBS、巨噬細(xì)胞生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢(shì)：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià)，超過一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，優(yōu)秀的科研隊(duì)伍，*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。

紅細(xì)胞生成素(EPO)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Erythropoietin (EPO) 96T Y17765 Rattus norvegicus (Rat)
胞外超氧化物歧化酶(SOD3)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Superoxide Dismutase 3, Extracellular (SOD3) 96T Y17766 Mus musculus (Mouse)
組蛋白H4(H4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Histone H4 (H4) 96T Y17767 Mus musculus (Mouse)
半乳糖凝集素9(GAL9)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Galectin 9 (GAL9) 96T Y17768 Homo sapiens (Human)
補(bǔ)體成分5a(C5a)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Complement Component 5a (C5a) 96T Y17769 Rattus norvegicus (Rat)
雌激素受體β(ERβ)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Estrogen Receptor Beta (ERb) 96T Y17770 Homo sapiens (Human)
氨基端前腦鈉素(NT-ProBNP)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for N-Terminal Pro Brain Natriuretic Peptide (NT-ProBNP) 96T Y17771 Canis familiaris; Canine (Dog)
Ⅰ型前膠原羧基端原肽(PⅠCP)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Procollagen I C-Terminal Propeptide (PICP) 96T Y17772 Homo sapiens (Human)
血小板反應(yīng)蛋白(THBS1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Thrombospondin 1 (THBS1) 96T Y17773 Mus musculus (Mouse)
分泌型免疫球蛋白A(sIgA)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Secretory Immunoglobulin A (sIgA) 96T Y17774 Bos taurus; Bovine (Cattle)
轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(TTR)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Transthyretin (TTR) 96T Y17775 Homo sapiens (Human)
酶抗體IgG   0.2ml
Anti-Phospho-Syk (Tyr323) /FITC   熒光素標(biāo)記磷酸化非受體型*蛋白激酶抗體IgG   0.2ml
Anti-Phospho-Syk (Tyr525/526) /FITC   熒光素標(biāo)記磷酸化非受體型*蛋白激酶抗體IgG   0.2ml
Anti-SYT3/FITC  熒光素標(biāo)記突觸結(jié)合蛋白3抗體IgG   0.2ml
Anti-SAP-1/FITC  熒光素標(biāo)記抗突觸素抗體IgG   0.2ml
Anti-Synapsin I /FITC  熒光素標(biāo)記神經(jīng)突觸素1抗體IgG   0.2ml
Anti-Syntrophins/SNTA1/Syntrophin α1/FITC  熒光素標(biāo)記神經(jīng)肌肉接頭蛋白SNTA1抗體IgG   0.2ml
Anti-alpha-Synuclein/FITC  熒光素標(biāo)記核突觸蛋白-α抗體（C端）IgG   0.2ml
Anti-Synaptopodin/FITC  熒光素標(biāo)記突觸極蛋白synaptopodin抗體IgG   0.2ml
Anti-Synapsin II /FITC  熒光素標(biāo)記神經(jīng)突觸素2抗體IgG   0.2ml
Anti- Alpha-Synuclein/FITC  熒光素標(biāo)記核突觸蛋白-α抗體IgG   0.2ml
Anti-phospho-Synapsin I (Ser9) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體IgG   0.2ml
Anti-phospho-Synapsin I (Ser553) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體IgG   0.2ml
Anti- Gamma-Synuclein/SNCG /FITC  熒光素標(biāo)記核突觸蛋白-γ抗體IgG   0.2ml
Anti-Syntaxin 1/Syn1A /FITC  熒光素標(biāo)記突觸融合蛋白1抗體IgG   0.2ml
Anti-Alpha-Synuclein/FITC  熒光素標(biāo)記核突觸蛋白/突觸素-1抗體IgG   0.2ml
Anti-SYPH1/FITC  熒光素標(biāo)記synphilin-1抗體IgG   0.2ml
Anti-SYVN1/FITC  熒光素標(biāo)記滑膜細(xì)胞凋亡抑制物1抗體IgG   0.2ml
Anti-TNF- Alpha /Biotin  *標(biāo)記 腫瘤壞死因