【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
1.產品名稱：大鼠脊髓神經元細胞操作步驟
2.組織來源：脊髓組織
3.產品規格：5×10^5cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介：
大鼠脊髓神經元細胞分離自脊髓組織；脊髓是細細的管束狀的神經結構，位于脊柱的椎管內且被脊椎保護；是源自腦的中樞神經系統延伸部分。中樞神經系統的細胞依靠復雜的來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經信息。人和脊椎動物中樞神經系統的一部分，在椎管里面，上端連接延髓，兩旁發出成對的神經，分布到四肢、體壁和內臟。脊髓的內部有一個H形（蝴蝶型）灰質區，主要由神經細胞構成；在灰質區周圍為白質區，主要由有髓神經纖維組成；脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發出許多成對的神經（稱為脊神經）分布到全身皮膚、肌肉和內臟器官。脊髓是周圍神經與腦之間的通路，也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經的出入可把脊髓也分為相應的31節，31對脊神經就是由不同的脊椎發出的。神經系統zui基本的結構和功能單位是神經元，即神經細胞，其大小和外觀在中樞神經系統中差異很大。但都具有胞體和樹突、軸突。胞體又叫核周體，內含神經絲、微管、內質網、游離核糖體和一個有明顯核仁的核。一些大神經元突起的粗面內質網可用Nissl染色顯示，在光鏡下是灰藍色斑塊狀，稱為尼氏小體。樹突和軸突是神經元的突起，能在神經元之間傳遞電沖動，突起的大小和形態各不相同，很難用常規的顯微鏡鑒別。脊髓組織內含有大量膠質細胞，神經元含量少，分離純化難度大，且脊髓神經元細胞是高度分化的終末細胞，不能分裂增殖，培養要求高。剛接種的脊髓神經元呈圓形，體積小，透亮，無突起。培養2-3d，可見胞體增大，突起增多延長；培養6-7d，細胞體大飽滿，突起明顯增加延長并交織成網，光暈明顯，立體感強。培養20d后，死亡細胞明顯增加，細胞出現內空泡，突起粗細不均，甚至脫壁，發生細胞崩解。
本公司的大鼠脊髓神經元細胞采用膠原酶-*聯合消化法、神經元培養基培養篩選結合化學試劑抑制法制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經MAP-2免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養基信息：
Neurobasal-A、B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態圖片，五天內有問題公司負責重發，超過五天時限至一個月內重發細胞收半價，超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠，完善、穩定的實驗體系，優秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Gamma (IFNg) 96T Y17640 Canis familiaris; Canine (Dog)
干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Gamma (IFNg) 96T Y17641 Chicken (Gallus)
干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Gamma (IFNg) 96T Y17642 Cavia (Guinea pig )
干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Gamma (IFNg) 96T Y17643 Sus scrofa; Porcine (Pig)
干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Gamma (IFNg) 96T Y17644 Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Gamma (IFNg) 96T Y17645 Rhesus monkey (Simian)
粒細胞集落刺激因子(GCSF)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Colony Stimulating Factor 3, Granulocyte (GCSF) 96T Y17646 Homo sapiens (Human)
粒細胞集落刺激因子(GCSF)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Colony Stimulating Factor 3, Granulocyte (GCSF) 96T Y17647 Mus musculus (Mouse)
粒細胞集落刺激因子(GCSF)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Colony Stimulating Factor 3, Granulocyte (GCSF) 96T Y17648 Rattus norvegicus (Rat)
膠質細胞系來源神經營養因子(GDNF)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Glial Cell Line Derived Neurotrophic Factor (GDNF) 96T Y17649 Mus musculus (Mouse)
膠質細胞系來源神經營養因子(GDNF)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Glial Cell Line Derived Neurotrophic Factor (GDNF) 96T Y17650 Rattus norvegicus (Rat)
核糖核酸酶T2(RNASET2)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Ribonuclease T2 (RNASET2
Anti-PTP-1B/FITC 熒光素標記PTP-1B蛋白抗體IgG 0.2ml
Anti-PTPRJ/CD148/DEP1/FITC 熒光素標記CD148抗體IgG 0.2ml
Anti-CD150/SLAM/FITC 熒光素標記CD150抗體IgG 0.2ml
Rabbit Anti-human sIgA/FITC 熒光素標記兔抗人分泌型IgA抗體 0.2ml
Anti-Rabbit Anti--mouse IgA/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗小鼠IgA抗體 0.2ml
Anti-PTTG/FITC 熒光素標記垂體腫瘤轉化基因抗體IgG 0.2ml
Anti-Raptor /FITC 熒光素標記mTOR相關調控蛋白抗體IgG 0.2ml
Anti-Rad17/FITC 熒光素標記細胞周期檢控Rad17蛋白抗體IgG 0.2ml
Anti-Phospho-Rad17 (Ser645) /FITC 熒光素標記磷酸化細胞周期檢控Rad17蛋白抗體IgG 0.2ml
Anti-Rad51/FITC 熒光素標記Rad51抗體IgG 0.2ml
Anti-Rad52/FITC 熒光素標記Rad52抗體IgG 0.2ml
Anti-RAD51C/FITC 熒光素標記癌和卵巢癌易感基因RAD51C抗體IgG 0.2ml
Anti-RAM-11/FITC 熒光素標記抗RAM-11抗體IgG 0.2ml
Anti-RAMP-1/FITC 熒光素標記受體活性調制蛋白1抗體IgG 0.2ml
anti-RAP1A/FITC 熒光素標記抗Rap1抗體IgG 0.2ml
Anti-RAR- Alpha /FITC 熒光素標記維甲酸受體-α 抗體IgG 0.2ml
Anti-RAR- Beta /FITC 熒光素標記維甲酸受體-β抗體IgG 0.2ml
Anti-Phospho-Raptor (Ser792) /FITC 熒光素標記磷酸化mTOR相關調控蛋白抗體IgG 0.2ml
Anti-RASSF1A/FITC 熒光素標記Ras相關區域家族1A抗體IgG 0.2ml
Anti-RASGRF1/FITC 熒光素標記Ras特異性*核
