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上海邦景實業(yè)有限公司
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更新時間:2017-07-26 13:36:59瀏覽次數(shù):195次
聯(lián)系我時,請告知來自 智慧城市網(wǎng)大鼠骨髓單核細胞操作步驟售后:收到細胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療操作步驟。
1.產(chǎn)品名稱:大鼠骨髓單核細胞操作步驟
2.組織來源:骨髓
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介:
大鼠骨髓單核細胞分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,zui后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單核細胞是一種未成熟的單核細胞,在骨髓細胞中約占0.04%,被認為是破骨細胞的前體細胞,較外周血單個核細胞誘導(dǎo)的破骨細胞得率高、全骨髓誘導(dǎo)法產(chǎn)生的破骨細胞數(shù)量多,純度高,較脾細胞誘導(dǎo)法分化效率高。骨髓單核細胞(BMMNCs)是從股骨或脛骨骨髓中分離提取出來的原代細胞,它屬干細胞類型。目前,大多數(shù)研究用淋巴細胞分離液分離提取骨髓單核細胞,zui近也有采用免疫磁珠分離法分離骨髓單核細胞。
本公司的大鼠骨髓單核細胞采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶;細胞經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息:
DMEM-F12、FBS、Glutamine、Penicillin、Streptomycin等
細胞名稱 | 大鼠骨髓單核細胞操作步驟 |
規(guī)格 | 5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
價格 | 來電可享受優(yōu)惠 |
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
操作步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢:
1、細胞株種類齊全,包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內(nèi)膜細胞等
2、*,專業(yè)的細胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細胞株,免費復(fù)蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片,三天回傳細胞生長狀態(tài)圖片,五天內(nèi)有問題公司負責(zé)重發(fā),超過五天時限至一個月內(nèi)重發(fā)細胞收半價,超過一個月重發(fā)全額收費。
5、經(jīng)濟、實惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實驗體系,優(yōu)秀的科研隊伍,*的實驗設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Chemokine Like Factor Superfamily 4 (CKLFSF4) 96T Y17601 Mus musculus (Mouse)
趨化素樣因子超家族成員4(CKLFSF4)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Chemokine Like Factor Superfamily 4 (CKLFSF4) 96T Y17602 Rattus norvegicus (Rat)
趨化素樣因子超家族成員5(CKLFSF5)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Chemokine Like Factor Superfamily 5 (CKLFSF5) 96T Y17603 Homo sapiens (Human)
趨化素樣因子超家族成員5(CKLFSF5)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Chemokine Like Factor Superfamily 5 (CKLFSF5) 96T Y17604 Mus musculus (Mouse)
趨化素樣因子超家族成員5(CKLFSF5)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Chemokine Like Factor Superfamily 5 (CKLFSF5) 96T Y17605 Rattus norvegicus (Rat)
趨化素樣因子超家族成員6(CKLFSF6)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Chemokine Like Factor Superfamily 6 (CKLFSF6) 96T Y17606 Homo sapiens (Human)
趨化素樣因子超家族成員6(CKLFSF6)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Chemokine Like Factor Superfamily 6 (CKLFSF6) 96T Y17607 Mus musculus (Mouse)
趨化素樣因子超家族成員6(CKLFSF6)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Chemokine Like Factor Superfamily 6 (CKLFSF6) 96T Y17608 Rattus norvegicus (Rat)
Epigen蛋白(EPG)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Epigen (EPG) 96T Y17609 Homo sapiens (Human)
Epigen蛋白(EPG)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Epigen (EPG) 96T Y17610 Mus musculus (Mouse)
Epigen蛋白(EPG)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Epigen (EPG) 96T Y17611 Rattus norvegicus (Rat)
Anti-Insulin/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記胰島素抗體IgG 0.2ml
Anti-PLAU/uPA/FITC 熒光素標(biāo)記*型纖溶酶原激活因子抗體IgG 0.2ml
Anti-Plectin/FITC 熒光素標(biāo)記網(wǎng)蛋白抗體IgG 0.2ml
Anti-PLAUR/uPAR/FITC 熒光素標(biāo)記*型纖溶酶原激活因子受體抗體IgG 0.2ml
Anti-Plexin A1/Plexin 1/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)叢蛋白A1抗體IgG 0.2ml
Anti-Plexin A2/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)叢蛋白A2抗體IgG 0.2ml
Anti-Plexin B1/Semaphorin receptor/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)叢蛋白B1抗體IgG 0.2ml
Anti-PLASTIN3/T Plastin/FITC 熒光素標(biāo)記絲束蛋白T Plastin抗體IgG 0.2ml
Anti-PLG/FITC 熒光素標(biāo)記纖維蛋白溶酶原抗體IgG 0.2ml
Anti-PLGF/FITC 熒光素標(biāo)記胎盤生長因子抗體IgG 0.2ml
Anti-PLGF /FITC 熒光素標(biāo)記人胎盤生長因子(抗體)IgG 0.2ml
Anti-PLGF/FITC 熒光素標(biāo)記小鼠胎盤生長因子抗體IgG 0.2ml
Anti-PMP2 /FITC 熒光素標(biāo)記周圍神經(jīng)髓鞘蛋白2抗體IgG 0.2ml
Anti-PMP-22/FITC 熒光素標(biāo)記外周髓鞘蛋白-22IgG 0.2ml
Anti-PMSA/FOLH1/FITC 熒光素標(biāo)記前列腺特異膜抗原抗體IgG 0.2ml
Anti-PMS2/FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤錯配修復(fù)基因PMS2抗體IgG 0.2ml
Anti-PLK1/STPK13/FITC 熒光素標(biāo)記絲/*蛋白激酶Plk1抗體IgG 0.2ml
Anti-Phospho-PLK1 (Thr210)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化絲/*蛋白激酶Plk1抗體IgG 0.2ml
Anti-Podoplanin Protein/FITC 熒光素標(biāo)記平足蛋白抗體IgG 0.2ml
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