【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
1.產品名稱：大鼠肺泡巨噬細胞操作步驟
2.組織來源：肺組織
3.產品規格：5×10^5cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介：
大鼠肺泡巨噬細胞分離自肺組織；肺是機體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經肺系（指氣管、支氣管等）與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。肺泡由單層上皮細胞構成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經多次反復分枝成無數細支氣管，它們的末端膨大成囊，囊的四周有很多突出的小囊泡，即為肺泡。巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞較易獲得，便于培養，并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養，難以*生存。巨噬細胞（Macrophages）是一種位于組織內的白血球，源自單核細胞，而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞，在脊椎動物體內參與非特異性防衛（先天性免疫）和特異性防衛（細胞免疫）。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用（即吞噬以及消化），并激活淋巴球或其他免疫細胞，令其對病原體作出反應。肺泡巨噬細胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍，有重要防御功能。肺泡是重要的巨噬細胞儲存器官，為結核病的研究提供了重要的材料。
本公司的大鼠肺泡巨噬細胞采用機械研磨結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經CD68免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養基信息：
DMEM[H]、FBS、巨噬細胞生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態圖片，五天內有問題公司負責重發，超過五天時限至一個月內重發細胞收半價，超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠，完善、穩定的實驗體系，優秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
疫分析法) CLIA Kit for Fibroblast Growth Factor 4 (FGF4) 96T Y17561 Rattus norvegicus (Rat)
成纖維細胞生長因子6(FGF6)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Fibroblast Growth Factor 6 (FGF6) 96T Y17562 Danio rerio (Zebrafish)
成纖維細胞生長因子6(FGF6)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Fibroblast Growth Factor 6 (FGF6) 96T Y17563 Homo sapiens (Human)
成纖維細胞生長因子6(FGF6)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Fibroblast Growth Factor 6 (FGF6) 96T Y17564 Mus musculus (Mouse)
成纖維細胞生長因子6(FGF6)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Fibroblast Growth Factor 6 (FGF6) 96T Y17565 Rattus norvegicus (Rat)
成纖維細胞生長因子9(FGF9)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Fibroblast Growth Factor 9 (FGF9) 96T Y17566 Bos taurus; Bovine (Cattle)
成纖維細胞生長因子9(FGF9)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Fibroblast Growth Factor 9 (FGF9) 96T Y17567 Chicken (Gallus)
成纖維細胞生長因子9(FGF9)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Fibroblast Growth Factor 9 (FGF9) 96T Y17568 Homo sapiens (Human)
成纖維細胞生長因子9(FGF9)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Fibroblast Growth Factor 9 (FGF9) 96T Y17569 Mus musculus (Mouse)
成纖維細胞生長因子9(FGF9)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Fibroblast Growth
0.2ml
Anti-JNK3/MAPK10/FITC 熒光素標記氨基末端激酶3抗體IgG 0.2ml
Anti-phospho-STAT6(pThr641)/FITC 熒光素標記抗磷酸化信號轉導和轉錄激活因子6抗體IgG 0.2ml
Anti-phospho-Src(pTyr529)/FITC 熒光素標記抗磷酸化Src原癌基因抗體IgG 0.2ml
Anti-phospho c-Raf/RAF1(pSer338/pTyr340)/FITC 熒光素標記抗磷酸化原癌基因c-raf抗體IgG 0.2ml
Anti-phospho-c-Raf (Ser289) /FITC 熒光素標記磷酸化原癌基因c-Raf抗體IgG 0.2ml
Anti-phospho-c-Raf (Ser259)/FITC 熒光素標記磷酸化原癌基因c-Raf抗體IgG 0.2ml
Anti-phospho-c-Raf (Ser296) /FITC 熒光素標記磷酸化原癌基因c-Raf抗體IgG 0.2ml
Anti-phospho-c-Raf (Ser338) /FITC 熒光素標記磷酸化原癌基因c-Raf抗體IgG 0.2ml
Anti-phospho C-Myc(pThr58/pSer62)/FITC 熒光素標記抗磷酸化致癌基因C-Myc抗體IgG 0.2ml
Anti-phospho C-Met/pHGFR(pTyr1365)/FITC 熒光素標記抗磷酸化原癌基因c-Met抗體IgG 0.2ml
Anti-phospho-c-Jun/AP-1(pThr91/pThr93)/FITC 熒光素標記抗磷酸化原癌基因c-Jun抗體IgG 0.2ml
Anti-phospho-c-Jun (Ser243) /FITC 熒光素標記磷酸化原癌基因c-Jun抗體IgG 0.2ml
Anti-phospho-c-Jun (Thr93) /FITC 熒光素標記磷酸化原癌基因c-Jun抗體IgG 0.2ml
Anti-phospho-c-Jun (Ser63) /FITC 熒光素標記磷酸化原癌基因c-Jun抗體IgG 0.2ml
Anti-phospho-MEK1/MAPKK1(pSer298)/FITC 熒光素標記抗磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體IgG 0.2ml
Anti-phospho Histone H1,4(pSer27)/FITC 熒光素標記抗磷酸化組蛋白H1,4樣蛋白抗體IgG
