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大鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞實驗方法

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所  在  地上海市

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更新時間:2017-07-26 13:54:07瀏覽次數(shù):199次

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產(chǎn)品簡介

大鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞實驗方法售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

1.產(chǎn)品名稱:大鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞實驗方法

2.組織來源:結(jié)腸組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介:

大鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞分離自結(jié)腸組織;結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸,在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部分,大部分固定于腹后壁,結(jié)腸的排列酷似英文字母“M”,將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為:黏膜(上皮層、固有層、黏膜肌層),黏膜下層(疏松結(jié)締組織),肌層(內(nèi)環(huán)形、外縱行兩層平滑肌),外膜(纖維膜或漿膜)。腸黏膜上皮細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障,持續(xù)暴露于大量抗原中,也是機(jī)體面對病原微生物的*道防線。因此,腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞,在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用,它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強度。探討正常結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞的分離、體外培養(yǎng)方法,為研究腸黏膜上皮細(xì)胞以及與腸黏膜相關(guān)疾病建立合適的細(xì)胞模型。

本公司的大鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞采用先機(jī)械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶;細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18/PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

5.培養(yǎng)基信息:

M199、FBS、上皮細(xì)胞生長添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等

細(xì)胞名稱大鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞實驗方法
規(guī)格5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
價格來電可享受優(yōu)惠

優(yōu)勢:
1、細(xì)胞株種類齊全,包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*,專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細(xì)胞株,免費復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片,三天回傳細(xì)胞生長狀態(tài)圖片,五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā),超過五天時限至一個月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價,超過一個月重發(fā)全額收費。
5、經(jīng)濟(jì)、實惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實驗體系,優(yōu)秀的科研隊伍,*的實驗設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
干擾素γ誘導(dǎo)單核因子(MIγ)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Monokine Induced By Interferon Gamma (MIg) 96T Y17508 Mus musculus (Mouse)
干擾素γ誘導(dǎo)單核因子(MIγ)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Monokine Induced By Interferon Gamma (MIg) 96T Y17509 Rattus norvegicus (Rat)
表皮調(diào)節(jié)素(EREG)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Epiregulin (EREG) 96T Y17510 Mus musculus (Mouse)
表皮調(diào)節(jié)素(EREG)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Epiregulin (EREG) 96T Y17511 Rattus norvegicus (Rat)
轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGFβ3)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Transforming Growth Factor Beta 3 (TGFb3) 96T Y17512 Homo sapiens (Human)
轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGFβ3)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Transforming Growth Factor Beta 3 (TGFb3) 96T Y17513 Mus musculus (Mouse)
轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGFβ3)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Transforming Growth Factor Beta 3 (TGFb3) 96T Y17514 Rattus norvegicus (Rat)
轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGFβ3)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Transforming Growth Factor Beta 3 (TGFb3) 96T Y17515 Sus scrofa; Porcine (Pig)
白介素4誘導(dǎo)蛋白1(IL4I1)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 4 Induced Protein 1 (IL4I1) 96T Y17516 Homo sapiens (Human)
白介素4誘導(dǎo)蛋白1(IL4I1)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 4 Induced Protein 1 (IL4I1) 96T Y17517 Mus musculus (Mouse)
Anti-P-cadherin/FITC  熒光素標(biāo)記P-鈣粘附分子抗體IgG   0.2ml
Anti-R-cadherin /FITC  熒光素標(biāo)記R-鈣粘附分子抗體IgG   0.2ml
Anti-PCNA/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗增值細(xì)胞核抗原抗體IgG   0.2ml
Anti-PCNA/FITC  熒光素標(biāo)記增殖細(xì)胞核抗原抗體IgG   0.2ml
Anti-PCNA/FITC  熒光素標(biāo)記增殖細(xì)胞核抗原抗體IgG   0.2ml
Anti-PCNA/FITC  熒光素標(biāo)記增殖細(xì)胞核抗原抗體IgG   0.2ml
Anti-PCX/FITC  熒光素標(biāo)記足細(xì)胞特異蛋白抗體   0.2ml
Anti-PD-1/FITC  熒光素標(biāo)記程序性死亡1抗體IgG   0.2ml
ANti-PDCD4/FITC  熒光素標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白4抗體IgG   0.2ml
Anti-TFAR19/PDCD5 /FITC  熒光素標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白TFAR19抗體IgG   0.2ml
Anti-PDE4D/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸二酯酶4D抗體IgG   0.2ml
Anti-PDEF/FITC  熒光素標(biāo)記上皮特異性ETs轉(zhuǎn)錄因子抗體IgG   0.2ml
Anti-PDGF-A/FITC  熒光素標(biāo)記血小板源性生長因子-A抗體IgG   0.2ml
Anti-PDGF-B/FITC  熒光素標(biāo)記血小板源性生長因子-B抗體IgG   0.2ml
Anti-PDGF-BB/FITC  熒光素標(biāo)記血小板源性生長因子-BB抗體IgG   0.2ml
Anti-PDGF-R-A/FITC  熒光素標(biāo)記血小板源性生長因子受體-A抗體IgG   0.2ml
Anti-Phospho-PDGF Receptor alpha (Tyr1018)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化血小板源性生長因子受體-α抗體IgG   0.2ml
Anti-Phospho-PDGF Receptor alpha (Tyr754) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化血小板源性生長因子受體-α抗體IgG   0.2ml
Anti-Phospho-PDGF Receptor alpha(Tyr849)/PDGF Receptor beta (Tyr857)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化血小板源性生長因子受體α/β抗體IgG


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