【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
1.產品名稱：大鼠小腸Cajal間質細胞操作步驟
2.組織來源：小腸組織
3.產品規格：5×10^5cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介：
大鼠小腸Cajal間質細胞分離自小腸組織；小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內，上連胃幽門，下接盲腸，分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的，因為食物經過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后，基本上完成了消化過程，同時營養物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環形皺襞，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺，其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切；構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似，絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣。Cajal間質細胞（ICC）是一類主要分布于胃腸道的間質細胞，是胃腸道的起搏細胞和信號傳導細胞，與肌細胞以及末梢神經元有著緊密的關系，具有激發和促進胃腸蠕動的作用。借助于電子顯微鏡技術，清楚觀察到了ICC位置分布和內部精細結構；應用免疫熒光等生化技術，發現了其特殊表達的c-kit蛋白；利用電生理技術，得知多種胃腸動力障礙疾病也與其異常有關。多年來，學者逐漸在胃腸道、膽道、膀胱、子宮等部位發現了ICC的蹤跡，并試圖闡述其與某些疾病的發生機制。
本公司的大鼠小腸Cajal間質細胞采用膠原酶消化法結合組織貼塊法制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經c-kit免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養基信息：
DMEM-F12、FBS、EGF、bFGF、SCF、Penicillin、Streptomycin等
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態圖片，五天內有問題公司負責重發，超過五天時限至一個月內重發細胞收半價，超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠，完善、穩定的實驗體系，優秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
分析法) CLIA Kit for Thyrotroph Embryonic Factor (TEF) 96T Y17362 Homo sapiens (Human)
促甲狀腺素胚胎因子(TEF)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Thyrotroph Embryonic Factor (TEF) 96T Y17363 Mus musculus (Mouse)
促甲狀腺素胚胎因子(TEF)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Thyrotroph Embryonic Factor (TEF) 96T Y17364 Rattus norvegicus (Rat)
基質金屬蛋白酶3(MMP3)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3) 96T Y17365 Bos taurus; Bovine (Cattle)
基質金屬蛋白酶3(MMP3)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3) 96T Y17366 Canis familiaris; Canine (Dog)
基質金屬蛋白酶3(MMP3)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3) 96T Y17367 Equus caballus; Equine (Horse)
基質金屬蛋白酶3(MMP3)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3) 96T Y17368 Mus musculus (Mouse)
基質金屬蛋白酶3(MMP3)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3) 96T Y17369 Sus scrofa; Porcine (Pig)
基質金屬蛋白酶3(MMP3)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3) 96T Y17370 Rattus norvegicus (Rat)
基質金屬蛋白酶3(MMP3)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3) 96T Y17371 Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
體(肌細胞生成素)IgG 0.2ml
Anti-RIP3/FITC 熒光素標記受體結合**激酶3抗體IgG 0.2ml
Anti-MYOZ/MYOZ1 /FITC 熒光素標記MYOZ抗體IgG 0.2ml
Anti-MYSM1/FITC 熒光素標記MYSM1抗體IgG 0.2ml
Anti-CHRNA4/FITC 熒光素標記煙堿型乙酰*受體α4抗體IgG 0.2ml
Anti-CHRNA7/FITC 熒光素標記煙堿型乙酰*受體α7抗體IgG 0.2ml
Anti-NADPH/FITC 熒光素標記抗NADPH氧化酶抗體IgG 0.2ml
Anti-Nanog/FITC 熒光素標記胚胎干細胞關鍵蛋白抗體IgG 0.2ml
Anti-NAIF1 protein/FITC 熒光素標記核凋亡誘導因子蛋白1抗體IgG 0.2ml
Anti-NAP1 /FITC 熒光素標記核小體組裝蛋白1抗體IgG 0.2ml
Anti-PNAT/NAT2/FITC 熒光素標記N-乙酰基轉移酶2抗體IgG 0.2ml
Anti-Natrexone/FITC 熒光素標記兔抗納曲酮抗體IgG 0.2ml
Anti-NB3/CNTN6/FITC 熒光素標記抗神經細胞NB3特定蛋白抗體IgG 0.2ml
Anti-Contactin-6/mNB-3/FITC 熒光素標記NB-3神經粘附蛋白抗體IgG 0.2ml
Anti-NBS1/FITC 熒光素標記DNA修復蛋白NBS1抗體IgG 0.2ml
Anti-Phospho-p95/NBS1 (Ser343) /FITC 熒光素標記磷酸化DNA修復蛋白NBS1抗體IgG 0.2ml
Anti-N-cadherin /FITC 熒光素標記N-鈣粘附分子抗體IgG 0.2ml
Anti-CD171/NCAM-L1/FITC 熒光素標記神經細胞粘附分子配體1抗體IgG 0.2ml
Anti-CD172a/SIRP Alpha/FITC 熒光素標記信號調節蛋白α抗體IgG 0.2ml
Anti-NCF/NCF4/p40phox/FITC 熒光素標記嗜中性粒細胞胞漿因子4抗體IgG 0.2ml
Anti-nck2/FITC 熒光素標記NCK銜接因子蛋白2抗體
