【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

1.產(chǎn)品名稱：小鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞操作步驟

2.組織來源：肺動(dòng)脈組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：

小鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞分離自肺動(dòng)脈組織；肺動(dòng)脈亦稱肺動(dòng)脈干。在呼吸空氣的脊椎動(dòng)物中，把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動(dòng)脈。肺大動(dòng)脈起于右心室，在主動(dòng)脈之前向左上后方斜行，在主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈，經(jīng)肺門入肺。肺動(dòng)脈干位于心包內(nèi)，為一粗短的動(dòng)脈干。起自右心室，在升主動(dòng)脈前方向左后上方斜行，至主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈。左肺動(dòng)脈較短，在左主支氣管前方橫行，分二支進(jìn)入左肺上、下葉。右肺動(dòng)脈較長(zhǎng)而粗，經(jīng)升主動(dòng)脈和上腔靜脈后方向右橫行，至右肺門處分為三支進(jìn)入右肺上、中、下葉。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來；成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁*，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持肺動(dòng)脈的正常形態(tài)；合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)；組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。

本公司的小鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞采用*-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶；細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

5.培養(yǎng)基信息：

DMEM[H]、FBS、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢(shì)：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購(gòu)買本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià)，超過一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，優(yōu)秀的科研隊(duì)伍，*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
Y17104 Rattus norvegicus (Rat)
促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Adrenocorticotropic Hormone (ACTH) 96T Y17105 Homo sapiens (Human)
促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Adrenocorticotropic Hormone (ACTH) 96T Y17106 Mus musculus (Mouse)
促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Adrenocorticotropic Hormone (ACTH) 96T Y17107 Rattus norvegicus (Rat)
催乳素(PRL)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Prolactin (PRL) 96T Y17108 Homo sapiens (Human)
抵抗素(RETN)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Resistin (RETN) 96T Y17109 Mus musculus (Mouse)
多巴胺(DA)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Dopamine (DA) 96T Y17110 General
核因子κB受體激活因子配基(RANκL)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Receptor Activator Of Nuclear Factor Kappa B Ligand (RANkL) 96T Y17111 Homo sapiens (Human)
Apelin 12蛋白(AP12)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Apelin 12 (AP12) 96T Y17112 Homo sapiens (Human)
Apelin 12蛋白(AP12)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Apelin 12 (AP12) 96T Y17113 Mus musculus (Mouse)
降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP) 96T Y17114 Homo sapiens (Human)
降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP) 96T Y17115 Mus musculus
Anti-IL-12/FITC  熒光素標(biāo)記抗白介素12抗體(人)IgG   0.2ml
Anti-IL-12R Beta1/CD212/FITC  熒光素標(biāo)記白細(xì)胞介素-12受體β1抗體IgG   0.2ml
Anti-IL-12R Beta2/FITC  熒光素標(biāo)記白細(xì)胞介素-12受體β2抗體IgG   0.2ml
Anti-IL-13/FITC   熒光素標(biāo)記白介素13抗體IgG   0.2ml
Anti-IL-13Ra1/FITC  熒光素標(biāo)記白細(xì)胞介素-13受體a1抗體IgG   0.2ml
Anti-IL-13Ra2/FITC  熒光素標(biāo)記白細(xì)胞介素-13受體a2抗體IgG   0.2ml
Anti-IL-14/Taxilin alpha/FITC  熒光素標(biāo)記抗白介素14抗體IgG   0.2ml
Anti-IL-15/FITC  熒光素標(biāo)記白介素15抗體IgG   0.2ml
Anti-IL-15R Alpha/FITC  熒光素標(biāo)記白介素15受體α抗體IgG   0.2ml
Anti-IL-16/FITC   熒光素標(biāo)記白細(xì)胞介素-16抗體IgG   0.2ml
Anti-IL-16/FITC  熒光素標(biāo)記白介素16抗體IgG   0.2ml
Anti-IL-17/FITC  熒光素FITC標(biāo)記白介素-17抗體IgG   0.2ml
Anti-IL-17B/FITC  熒光素標(biāo)記白介素-17B抗體IgG   0.2ml
Anti-IL-17/PE  熒光素PE標(biāo)記白介素-17抗體IgG   0.2ml
Anti-IL-17R/IL-17RA/CD217/FITC  熒光素標(biāo)記白介素17受體抗體IgG   0.2ml
Anti-IL-17(Interleukin-17)human/FITC  熒光素標(biāo)記白介素-17抗體（人）IgG   0.2ml
Anti-IL-17RC/IL-17RL/FITC  熒光素標(biāo)記白介素17受體C抗體IgG   0.2ml
Anti-IL-17RD/FITC  熒光素標(biāo)記白介素17受體D抗體IgG   0.2ml
Anti-IL-17RB/FITC  熒光素標(biāo)記白介素-17B受體抗體IgG   0.2ml
Anti-IL-17C/FITC  熒光素標(biāo)記白介素-17C抗體IgG